ЭлБиб

счетом выросших колоний с последующей статистической обра

боткой цифрового материала (И.П. Ашмарин, А.А. Воробьев,

1962; Ф. Герхард и др., 1983). Выполнение данного метода осу

ществимо при условии,vчто все вегетативноспособные микроб

ные клетки в предельных разведениях бактериальной суспензии

дадут начало визуально (обозначенному клону микробов, а это

зависит от ростовых способностей питательной среды.

Цель работы: определить чувствительность плотных питатель

ных сред различного состава к посеву десятикратных разведений

-бактериальной суспензии Р. multocida и выяснить их ростовые спо

собности при культивировании единичных микробных клеток, то

есть такого минимального количества микробов, когда каждая мик

робная клетка формирует отдельную изолированную колонию.

Материалы и методы. В работе использовали референтные

штаммы Р. multocida № 115, 656, 9 серотипов А, В и Д, полученные

в ВГНКИ. В качестве питательных сред испытали МПА, МПА с сы

вороткой крови крупного рогатого скота и лошади, МПА с кровью

морской свинки, кррдика, барана, крупного рогатого скота. Пита

тельные среды готовили

то

общепринятым методикам, сыворотку

крови добавляли в количестве 20% к объему МПА, кровь - 10%.

Бактериальные суспензии каждого серотипа культивировали

в 100,0 см'* бульона по Хоттингеру при 37°С в течение 12 часов.

Для последовательных десятикратных разведений в стерильном

изотоническом растворе хлористого натрия отбирали пробу в

верхнем слое бульонной культуры без встряхивания флакона.

Сразу после раститровки делали высев разведенной бактериаль

ной суспензии на поверхность агара в 4 чашки Петри. Посевы

инкубировали при 37°С 24 часа. Рост оценивали визуально. Чис

тоту посевов и морфо-тинкториалькые характеристики выросших

культур контролировали микроскопией мазков, окрашенных по

Граму и Гинсу. Сводные данные представлены в таблице.

Таблица 1. Чувствительность плотных сред к посеву бакте

риальной суспезии Р. multocida

Отрицательный

десятичный логарифм разведения

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

+ -

+ + + + +

+ +

Питательная среда

МПА

МПА с сывороткой

МПА с кровью

Примечание. + - рост культуры;---- отсутствие роста

На основании сказанного выше можно сделать вывод.

1. Сыворотка крови крупного рогатого скота и лошади не

335

Научная электронная библиотека ЦНСХБ