186 / 604
деление его первичной структуры секвенированием. Выделение
вирусной РНК проводилось с использованием 2 М гуанидин изо
тиоцианата и GF /F фильтров, главным образом, из легких и
лимфоузлов. Амплификация фрагмента генома осуществлялась
методом гнездовой полимеразной цепной реакции (ПЦР) с пред
варительной обратной транскрипцией вирусной РНК. Две пары
праймеров для гнездовой ПЦР были определены на основе вы
равнивания нуклеотидных последовательностей нескольких штам
мов различных генотипов. Определение первичной структуры
проводилось методом прямого секвенирования с использованием
внутренней пары праймеров.
С использованием разработанного метода проведен анализ
около 200 полевых проб из хозяйств различных регионов РФ.
Продемонстрирована универсальность метода и его способность
детектировать штаммы вируса обоих генотипов. Процедура детек
ции вирусной РНК занимает 2-3 часа. Определена первичная
структура более 20 полевых изолятов вируса. Анализ полученных
данных выявил принадлежность выделенных изолятов к европей
скому генотипу со значительными вариациями в структуре нуклео-
капсидного гена. Отмеченные структурные особенности отечест
венных изолятов позволили разделить их на несколько подгрупп.
Разработанный метод и полученные данные могут быть ис
пользованы для совершенствования диагностики РРСС и изуче
ния филогенетических связей между различными штаммами и
изолятами вируса.
УДК 619 : 616. 98 : 828. 11 : 636. 2 2 /2 8
Критические периоды в развитии
инфекционного и эпизоотического процесса
инфекции вируса лейкоза крупного рогатого скота
АЛ, Русинович
Управление ветеринарии комитета по сельскому хозяйству и продовольствию
Минского облисполкома
Лейкоз крупного рогатого скота по-прежнему является од
ной из существенно значимых проблем в инфекционной патоло
гии этого вида животных.
Достоверно установлено, что этиологическим агентом болезни
является онкогенный РНК-содержащий вирус лейкоза крупного
рогатого скота (ВЛКРС). Вместе с тем в развитии инфекционного
182
Научная электронная библиотека ЦНСХБ