ЭлБиб

Разработка метода детекции

и штаммовой идентификации вируса репродуктивно

респираторного синдрома свиней (ВРРСС)

методом амплификации - секвенирования

нуклеокапсидного гена

В.А. Пыльное, А.В. Щербаков

В.Ф. Ковалиишн, В.Г. Андреев

Всероссийский НИИ защиты животных, г. Владимир

Репродуктивно-респираторный синдром (РРСС) - заболева

ние свиней, которое характеризуется серьезными репродуктив

ными проблемами у свиноматок и респираторными расстройст

вами у животных всех возрастов. Эта болезнь впервые была за

регистрирована в эпидемической форме в Северной Америке в

1987-88 годах, а затем в 1990-91 годах - в Европе. В настоя

щее время РРСС является эндемичной инфекцией в большинстве

стран мира. Этиологический агент заболевания - оболочечный

вирус, который принадлежит к семейству артеривирусов. РНК

вируса - одноцепочечная, положительной полярности, размером

около 15 тысяч нуклеотидов, содержит

открытых рамок считы

вания (ОРС), которые кодируют структурные и неструктурные

белки. Оболочка вирусных частиц состоит из нескольких минор

ных и 3 основных структурных белков - нуклеокапсидного, мем

бранного и основного оболочечного белка, которые кодируются

ОРС 7,

и 5 соответственно. Нуклеокапсидный белок является

основным антигенным белком, а ген нуклеокапсидного белка -

одним из наиболее консервативных участков генома (Gagnon,

1998). Анализ нуклеотидной и аминокислотной последовательно

сти вируса РРСС выявил наличие двух генотипов вируса - ев

ропейского и американского, которые демонстрируют значитель

ный уровень генетической дивергентности. Уровень нуклеотид

ной гомологии по куклеокапсидному гену между изолятами двух

генотипов не превышает 60% (Le Gall, 1998), что может созда

вать проблемы в лабораторной диагностике вируса молекулярно

биологическими методами.

Целью данной работы являлась разработка универсального

метода детекции и штаммовой идентификации изолятов вируса

РРСС, независимо от их принадлежности к конкретному геноти

пу. Метод состоит из трех основных этапов - выделения вирус

ной РНК из полевых образцов, амплификации фрагмента генома,

содержащего ген нуклеокапсидного белка и последующее опре-

У Д К 619:616.98:578.833:636.4:616-078

181

Научная эл ктронная библиотека ЦНСХБ