ЭлБиб

ОСОБЕННОСТИ СОМАТИЧЕСКИХ КЛЕТОК РАСТЕНИЙ ПРИ ДЛИТЕЛЬНОМ КУЛЬТИВИРОВАНИИ

ГЕНОМНАЯИЗМЕНЧИВОСТЬКЛЕТОК RAUWOLFIA SERPENTINA

BENTH.ПРИДЛ И ТЕЛЬНОМ КУЛЬТИВИРОВАНИИ

Спиридонова Е.В., СоловьянВ.Т., КунахВ.А.,

Институт молекулярной биологии и генетики НАН Украины, 252143 Киев,

ул. Заболотного, 150,

kunakh@imbig.kiev.ua

Используя методы рестрихционного анализа ДНК, дот-блот

гибридизации ряда клонированных последовательностей и генов с ДНК

нескольких видов раувольфии

(R.serpentina, R.verticillata, R.caffra,

R.canescens, R.vomitoria)

и пассируемой с 1964 г. каллусной ткани

раувольф ии змеиной

(R. serpentina)

выявлено сущ ественное

переустройство генома культивируемых клеток. Наблюдаемый ПДРФ

(полиморфизм длин рестрикционных фрагментов) в значительной мере

обусловлен изменениями фракций различных повторов, что выражается

в амплификации, деамплификации, делециях и других изменениях.

Анализ интактных растений различных видов раувольфии показал, что

для последовательностей изменяющихся в культивируемых клетках

раувольфии змеиной характерен межвидовой ПДРФ. В некоторых

случаях изменения, выявляемые в культивируемых клетках, были

найдены в геномах родственных видов интактных растений.

При помощи изошизомеров рестриктаз Mspl и Hpall показано, что в

культивируемых клетках происходят изменения в метилировании

последовательности C*CGG. Они существенно влияют на ПДРФ, что

было установлено методом блотгибридизации с использованием 32Р-

меченных генов рибосомальной ДНК (гороха), Rubisco (гороха) и SAR

A d h l-гена (кукурузы ). Эти модификации в определенной мере

обусловливали и межвидовые отличия.

Таким образом, при длительном культивировании клеток происходят

геномные изменения, обусловленные как перестройками определенных

последовательностей, так и модификацией ДНК путем метилирования

цитозиновы х оснований. Можно предположить существование

параллелизма между эволюцией генома в культуре и межвидовой

изменчивостью растений родственных видов раувольфии. Выдвигается

предположение о канализованном характере изменений генома в

популяциях культивируемых клеток.

2 0 4

Научная электронная библиотека ЦНСХБ