

117
расщепляющихся по гену устойчивости. Только сцепленные с геном
маркеры покажут различия, либо изменением месторасположения элек-
трофоретической полосы на геле (кодоминантные маркеры), либо са-
мим фактом ее присутствия/отсутствия (доминантные маркеры; снова
подчеркнем, что методы ДНК
-
фингерпринтинга наиболее подходящи
для
BSA
анализа). Как указывалось выше, эти сцепления должны быть
проверены картированием идентифицированных проявляющих разли-
чия маркеров.
Минимальный размер совокупности определяют установлением
максимальной вероятности возможности различить несцепленный по-
лиморфный маркер от сцепленного с геном. Эта вероятность зависит
как от типа популяции, так и от наследования маркера. Например, для
доминантного маркерного расщепления в популяции
F
2
, вероятность
нахождения независимого сцепленного с геном маркера, при размере
совокупности
n
, равна
.
Если в совокупности будет
всего лишь 4 особи, то тогда доля фальшивых позитивов составит 1%, а
в случае 10 особей
: 2
×
10
-6
. Именно поэтому, как правило, для анализа
используют от 10 до 15 особей. С другой стороны,
BSA
не обязательно
дает ответ по принципу «все или ничего». Иногда, вследствие того, что
в совокупности могут присутствовать один или несколько отдельных
индивидуальных рекомбинантных генотипов, а сцепление маркера и
изучаемого гена есть не у всех отобранных для анализа особей, между
совокупностями могут наблюдаться различия в интенсивности полос.
И
,
тем не менее, несмотря на эти ограничительные особенности,
целый ряд исследователей с успехом использовали
BSA
для картирова-
ния основных (менделевских) генов у растений. Например, ген
,
опреде-
ляющий пол у фисташкового дерева
[176]
, а также ген – восстановитель
фертильности у рапса
[95]
. Еще больше примеров можно найти для ге-
нов устойчивости к болезням, например, у салата
[198, 234, 263]
, бобов
[162]
или сосны
[98]
. Ряд других примеров приведен у
Michelmore [261].
Этот метод можно использовать также и для заполнения пробелов
в картах. Для этого совокупности должны быть составлены на основе
генотипов маркеров, фланкирующих интервал, который необходимо за-
полнить, при этом во внимание принимают только особи нерекомби-
нантные по данным локусами (например, особи
G
1
D
1
/
G
1
D
1
сравнивают с
Электро ная Научн я СельскоХозяйственная Библиотека