Table of Contents Table of Contents
Previous Page  119 / 202 Next Page
Information
Show Menu
Previous Page 119 / 202 Next Page
Page Background

117

расщепляющихся по гену устойчивости. Только сцепленные с геном

маркеры покажут различия, либо изменением месторасположения элек-

трофоретической полосы на геле (кодоминантные маркеры), либо са-

мим фактом ее присутствия/отсутствия (доминантные маркеры; снова

подчеркнем, что методы ДНК

-

фингерпринтинга наиболее подходящи

для

BSA

анализа). Как указывалось выше, эти сцепления должны быть

проверены картированием идентифицированных проявляющих разли-

чия маркеров.

Минимальный размер совокупности определяют установлением

максимальной вероятности возможности различить несцепленный по-

лиморфный маркер от сцепленного с геном. Эта вероятность зависит

как от типа популяции, так и от наследования маркера. Например, для

доминантного маркерного расщепления в популяции

F

2

, вероятность

нахождения независимого сцепленного с геном маркера, при размере

совокупности

n

, равна

.

Если в совокупности будет

всего лишь 4 особи, то тогда доля фальшивых позитивов составит 1%, а

в случае 10 особей

: 2

×

10

-6

. Именно поэтому, как правило, для анализа

используют от 10 до 15 особей. С другой стороны,

BSA

не обязательно

дает ответ по принципу «все или ничего». Иногда, вследствие того, что

в совокупности могут присутствовать один или несколько отдельных

индивидуальных рекомбинантных генотипов, а сцепление маркера и

изучаемого гена есть не у всех отобранных для анализа особей, между

совокупностями могут наблюдаться различия в интенсивности полос.

И

,

тем не менее, несмотря на эти ограничительные особенности,

целый ряд исследователей с успехом использовали

BSA

для картирова-

ния основных (менделевских) генов у растений. Например, ген

,

опреде-

ляющий пол у фисташкового дерева

[176]

, а также ген – восстановитель

фертильности у рапса

[95]

. Еще больше примеров можно найти для ге-

нов устойчивости к болезням, например, у салата

[198, 234, 263]

, бобов

[162]

или сосны

[98]

. Ряд других примеров приведен у

Michelmore [261].

Этот метод можно использовать также и для заполнения пробелов

в картах. Для этого совокупности должны быть составлены на основе

генотипов маркеров, фланкирующих интервал, который необходимо за-

полнить, при этом во внимание принимают только особи нерекомби-

нантные по данным локусами (например, особи

G

1

D

1

/

G

1

D

1

сравнивают с

Электро ная Научн я СельскоХозяйственная Библиотека