ЭлБиб

116

Поскольку в процессе беккроссирования интрогрессии подверга-

ется совершенно незначительная часть генома, то, как правило, чаще

всего встречаются первые две ситуации. Поэтому для поиска маркеров

изучаемого гена достаточно сравнить Р и Р΄, но при этом Д должен быть

использован в качестве контроля. Такая постановка проверочного экс-

перимента позволит удостовериться, что аллель Р΄ действительно полу-

чен от Д, а не является технической (ложные полоски на геле) или гене-

тической ошибкой (генетическое загрязнение перекрестным опылени-

ем).

Для сравнительного анализа подойдет любой тип маркера, но

лучше использовать геномный ДНК

фингерпринтинг, поскольку он мо-

жет предоставить широкий набор маркеров (электрофоретических по-

лос) в одном эксперименте, например,

AFLP, ISSR

и др. Тот факт, что

эти маркеры, как правило, доминантны

не является проблемой, по-

скольку в данном случае для любой фазы сцепления или расхождения

гамет, различия могут быть найдены. Если необходимо, то из доми-

нантных маркеров можно получить кодоминантные маркеры (например,

SCAR

). Чтобы удостовериться, что найденные подобным образом мар-

керы сцеплены с изучаемым геном, их необходимо картировать.

4.1.2.

Совокупный сегрегационный анализ

В первой половине 1990

х годов с помощью практически изоген-

ных линий были картированы несколько основных (менделевских) ге-

нов, прежде всего определяющих устойчивость к заболеваниям,

[104,

246, 261, 262, 290, 328, 388]

. Создание такого материала — процедура

довольно длительная по времени, поскольку требуется получить не-

сколько поколений

и иногда выявляются так называемые «фальшивые

позитивы» (сегмент родителя Д интрогрессируется, но не несет желае-

мый ген). В этом случае используют методологический подход, полу-

чивший название, совокупный сегрегационный анализ (

BSA) [24, 263].

Этот подход заключается в сравнении совокупности ДНК отдельных

особей, имеющих один и тот же генотип. Например, необходимо опре-

делить различия между совокупностью особей

(устойчивая гомози-

гота) и совокупностью особей

(неустойчивая гомозигота) для попу-

ляции

, рекомбинантных инбредных линий или удвоенных гаплоидов,

Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека