

105
физм составляет определенную часть изменчивости изучаемого призна-
ка (подход «генов
-
кандидатов»). Рассмотрим эти подходы.
3.5.8.1.
Клонирование
QTL
Для идентификации и выделения
QTL
методом позиционного
клонирования могут быть использованы генетические подходы, опи-
санные нами ранее
[13]
. Однако отсутствие дискретности, присущей
менделеевским признакам, или, другими словами, наличие продолжи-
тельности вариации у количественных признаков делает задачу более
сложной. Прежде всего, по статистическим причинам. Это значит, что
научный план проведения экспериментов должен быть по возможности
всеобъемлющ. В случае использования практически изогенных линий
или метода
BSA
для скрининга генотипов необходимо воспользоваться
маркерами, фланкирующими
QTL
, поскольку проведение фенотипиче-
ского скрининга с целью клонирования
QTL
при этом обычно невоз-
можно. По этой же причине для установленных районов
QTL
требуется
картирование с высоким разрешением. Позиционное клонирование ре-
ально осуществимо только лишь тогда, когда
QTL
локализован в интер-
вале меньше, чем одна сантиморганида и пока только у видов с малень-
ким размером генома. В идеале необходимо достичь дистанции между
маркерами и
QTL
равной примерно размеру
YAC
или
BAC
клона или
даже меньше. Для идентификации «неясных»
QTL
может понадобиться
проведение трансформации с целью установления истинной функцио-
нальной активности клонированных
QTL
. С другой стороны, вероятнее
всего, другие доказательства могут оказаться более эффективными, на-
пример те, что упомянуты в Главе
IV
при описании методологии клони-
рования основных (менделевских) генов: картирование с высоким раз-
решением единичных генов
-
кандидатов с целью нахождения ко
-
сегрегирующих с признаком клонов, биоинформативный анализ пер-
вичных аминокислотных и нуклеотидных последовательностей или
изучение соответствующей экспрессии (см. ниже). В любом случае
идентификация
QTL
посредством клонирования, по
-
видимому, должна
быть возможна или, как минимум, легче для
QTL
с большими эффекта-
ми и/или для признаков
,
у которых известны мутантные формы (напри-
Э
лектронна
о
я Научная СельскоХозяйственная Библиотека