Table of Contents Table of Contents
Previous Page  97 / 106 Next Page
Information
Show Menu
Previous Page 97 / 106 Next Page
Page Background

93

ментов ДНК

);

она оказалась незамени-

мой при анализе культур с низким уров-

нем полиморфизма, для растений с оп-

ределенными трудностями выделения

высококачественной ДНК, при отсутст-

вии информации о сиквенсах и в тех

случаях, когда исследовать геном дру-

гими методами длительно и дорого.

RAPD-

маркерная система является до-

минантной по типу наследования ал-

лельных вариантов и мультилокусной по

природе выявляемого полиморфизма.

Такими же свойствами обладает техно-

логия

AFLP

— полиморфизм длины ам-

плифицированных фрагментов. Это

сложный метод, позволяющий опреде-

лять генетические изменения, вызванные

точечными мутациями в сайтах рестрик-

ции или в участках отжига праймеров

(присутствие или отсутствие продукта

амплификации в спектре) и небольшими

вставками

-

делециями внутри рестрикци-

онного фрагмента (изменение размера

полосы в спектре). В сравнении с RAPD

-

методом AFLP

-

маркерная система отли-

чается более высоким уровнем выявляе-

мого полиморфизма

.

Что касается кормовых культур,

мультилокусные

RAPD-

и

AFLP-

марке

-

ры применялись для анализа генетиче-

ских вариаций в сортах и популяциях

клевера лугового

[9; 10].

На основе этих

методов изучали ДНК

-

полиморфизм и

проводили идентификацию сортообраз

-

цов и межвидовых гибридов многолет-

них злаковых трав

[11; 12; 13; 14].

Полезным инструментом для скри-

нинга биоразнообразия различных видов

кормовых культур в последние годы

стал метод микросателлитного анализа

(SSR-

маркирование). Микросателлиты

состоят из участков ДНК длиной в 2–

6

пар оснований, распространенных в

тандемных повторностях по всему эука-

риотическому геному, могут легко ам-

плифицироваться в процессе ПЦР. Ши-

рокое использование

SSR-

маркерной

системы для анализа кормовых много-

летних трав обусловлено особенностями

их генетической структуры. Большинст-

во видов характеризуется высоким уров-

нем внутрипопуляционной и межпопу-

ляционной генетической гетерогенности,

в результате чего при скрещивании ин-

дивидуальных генотипов можно наблю-

дать сегрегацию до четырех различных

аллелей на один локус. Мультиаллель-

ные кодоминантные SSR

-

маркеры наи-

лучшим образом подходят для монито-

ринга наследственности множественных

аллелей. Преимущества этого метода за-

ключаются также в его доступности,

простоте, высокой воспроизводимости

результатов.

С помощью

SSR-

маркеров исследо-

вали уровень генетической дифферен-

циации между сортами и популяциями

люцерны

[15; 16],

использовали их для

выявления ДНК

-

полиморфизма между

сортами многолетнего райграса

[17; 18],

при анализе биоразнообразия популяций

овсяницы тростниковидной

[19]

, при

изучении межсортового полиморфизма

клевера ползучего

[20]

и клевера лугово-

го

[21].

Работа по оптимизации технологии

генотипирования кормовых культур на

основе микросателлитного анализа про-

должается

.

Необходимо, чтобы эта вы-

сокоэффективная методология позволяла

осуществить скрининг большого коли-

чества растительных образцов с наи-

меньшими затратами и высокой воспро-

изводимостью результатов.

Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека