

93
ментов ДНК
);
она оказалась незамени-
мой при анализе культур с низким уров-
нем полиморфизма, для растений с оп-
ределенными трудностями выделения
высококачественной ДНК, при отсутст-
вии информации о сиквенсах и в тех
случаях, когда исследовать геном дру-
гими методами длительно и дорого.
RAPD-
маркерная система является до-
минантной по типу наследования ал-
лельных вариантов и мультилокусной по
природе выявляемого полиморфизма.
Такими же свойствами обладает техно-
логия
AFLP
— полиморфизм длины ам-
плифицированных фрагментов. Это
сложный метод, позволяющий опреде-
лять генетические изменения, вызванные
точечными мутациями в сайтах рестрик-
ции или в участках отжига праймеров
(присутствие или отсутствие продукта
амплификации в спектре) и небольшими
вставками
-
делециями внутри рестрикци-
онного фрагмента (изменение размера
полосы в спектре). В сравнении с RAPD
-
методом AFLP
-
маркерная система отли-
чается более высоким уровнем выявляе-
мого полиморфизма
.
Что касается кормовых культур,
мультилокусные
RAPD-
и
AFLP-
марке
-
ры применялись для анализа генетиче-
ских вариаций в сортах и популяциях
клевера лугового
[9; 10].
На основе этих
методов изучали ДНК
-
полиморфизм и
проводили идентификацию сортообраз
-
цов и межвидовых гибридов многолет-
них злаковых трав
[11; 12; 13; 14].
Полезным инструментом для скри-
нинга биоразнообразия различных видов
кормовых культур в последние годы
стал метод микросателлитного анализа
(SSR-
маркирование). Микросателлиты
состоят из участков ДНК длиной в 2–
6
пар оснований, распространенных в
тандемных повторностях по всему эука-
риотическому геному, могут легко ам-
плифицироваться в процессе ПЦР. Ши-
рокое использование
SSR-
маркерной
системы для анализа кормовых много-
летних трав обусловлено особенностями
их генетической структуры. Большинст-
во видов характеризуется высоким уров-
нем внутрипопуляционной и межпопу-
ляционной генетической гетерогенности,
в результате чего при скрещивании ин-
дивидуальных генотипов можно наблю-
дать сегрегацию до четырех различных
аллелей на один локус. Мультиаллель-
ные кодоминантные SSR
-
маркеры наи-
лучшим образом подходят для монито-
ринга наследственности множественных
аллелей. Преимущества этого метода за-
ключаются также в его доступности,
простоте, высокой воспроизводимости
результатов.
С помощью
SSR-
маркеров исследо-
вали уровень генетической дифферен-
циации между сортами и популяциями
люцерны
[15; 16],
использовали их для
выявления ДНК
-
полиморфизма между
сортами многолетнего райграса
[17; 18],
при анализе биоразнообразия популяций
овсяницы тростниковидной
[19]
, при
изучении межсортового полиморфизма
клевера ползучего
[20]
и клевера лугово-
го
[21].
Работа по оптимизации технологии
генотипирования кормовых культур на
основе микросателлитного анализа про-
должается
.
Необходимо, чтобы эта вы-
сокоэффективная методология позволяла
осуществить скрининг большого коли-
чества растительных образцов с наи-
меньшими затратами и высокой воспро-
изводимостью результатов.
Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека