Table of Contents Table of Contents
Previous Page  96 / 106 Next Page
Information
Show Menu
Previous Page 96 / 106 Next Page
Page Background

92

или амплификация участков ДНК с по-

мощью ДНК

-

полимеразы

in vitro

(мето-

ды на основе полимеразной цепной ре-

акции — ПЦР)

.

Развитие ПЦР

-

технологии привело к

созданию большого числа техник и сис-

тем маркирования, широко применяе-

мых в популяционных или генетико

-

селекционных исследованиях. Для ус-

пешного решения поставленных задач

молекулярные маркѐры, по мнению ряда

исследователей, должны отвечать опре-

деленным требованиям: селективно ней-

тральное поведение, кодоминантный ха-

рактер наследования, высокий уровень

полиморфизма и воспроизводимости ре-

зультатов, оптимальная частота встре-

чаемости в геноме по хромосомам

[8].

На сегодняшний день не существует

идеальных молекулярных маркѐров, ко-

торые полностью соответствовали бы

перечисленным показателям. Для каж-

дой методики характерны определенные

преимущества и недостатки, что и обу-

словливает их использование в зависи-

мости от цели исследований и особенно-

стей структуры изучаемого генома.

Применение современных маркѐр-

ных систем развивается в двух направ-

лениях. Это селекция с помощью маркѐ-

ров

(MAS

marker-assisted-selection

) и

ДНК

-

профилирование.

MAS

основана на

использовании маркѐров, сцепленных с

локусами, участвующими в контроле ге-

нов различных заболеваний и главных

генов количественных признаков. ДНК

-

профилирование предполагает исполь-

зование маркѐрного локуса для оценки

генетического разнообразия внутри и

между естественными и синтетическими

популяциями. Посредством молекуляр-

ного маркирования селекционер получа-

ет возможность на протяжении всей се-

лекционной программы осуществлять

контроль генетической системы популя-

ции и фиксировать процессы, происхо-

дящие в ней: механическое засорение и

переопыление, появление новых мута-

ций и т.п. ДНК

-

профилирование помога-

ет выявить полиморфные участки в ге-

номе и способствует решению ряда важ-

ных практических задач:

1)

установление филогенетических взаи-

моотношений между культурными и

дикорастущими видами — донорами

ценных признаков;

2)

оценка родительских генотипов и гиб-

ридов, подбор для скрещиваний гене-

тически дивергентных пар;

3)

выявление наличия или отсутствия

аллеля, хромосомы, гена

;

интрогрес-

сии сцепленных аллелей, контроли-

рующих количественные признаки;

4)

использование в молекулярной таксо-

номии, для определения степени род-

ства инбредных линий гибридов при

эффекте гетерозиса;

5)

применение в работе с мировыми ге-

нетическими ресурсами растений для

регистрации и обеспечения их со-

хранности; охрана авторских прав на

источники и формы из генетических

коллекций;

6)

идентификация сортов и генотипов в

селекции, семеноводстве и семенном

контроле.

В настоящее время известны различ-

ные модификации ПЦР

-

технологии в за-

висимости от природы используемых

праймеров и способа идентификации

полученных фрагментов амплифициро-

ванной ДНК. Одна из первых методик

получила название

RAPD (

полиморфизм

рандомно амплифицированных фраг-

Э

лектронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека