

92
или амплификация участков ДНК с по-
мощью ДНК
-
полимеразы
in vitro
(мето-
ды на основе полимеразной цепной ре-
акции — ПЦР)
.
Развитие ПЦР
-
технологии привело к
созданию большого числа техник и сис-
тем маркирования, широко применяе-
мых в популяционных или генетико
-
селекционных исследованиях. Для ус-
пешного решения поставленных задач
молекулярные маркѐры, по мнению ряда
исследователей, должны отвечать опре-
деленным требованиям: селективно ней-
тральное поведение, кодоминантный ха-
рактер наследования, высокий уровень
полиморфизма и воспроизводимости ре-
зультатов, оптимальная частота встре-
чаемости в геноме по хромосомам
[8].
На сегодняшний день не существует
идеальных молекулярных маркѐров, ко-
торые полностью соответствовали бы
перечисленным показателям. Для каж-
дой методики характерны определенные
преимущества и недостатки, что и обу-
словливает их использование в зависи-
мости от цели исследований и особенно-
стей структуры изучаемого генома.
Применение современных маркѐр-
ных систем развивается в двух направ-
лениях. Это селекция с помощью маркѐ-
ров
(MAS
—
marker-assisted-selection
) и
ДНК
-
профилирование.
MAS
основана на
использовании маркѐров, сцепленных с
локусами, участвующими в контроле ге-
нов различных заболеваний и главных
генов количественных признаков. ДНК
-
профилирование предполагает исполь-
зование маркѐрного локуса для оценки
генетического разнообразия внутри и
между естественными и синтетическими
популяциями. Посредством молекуляр-
ного маркирования селекционер получа-
ет возможность на протяжении всей се-
лекционной программы осуществлять
контроль генетической системы популя-
ции и фиксировать процессы, происхо-
дящие в ней: механическое засорение и
переопыление, появление новых мута-
ций и т.п. ДНК
-
профилирование помога-
ет выявить полиморфные участки в ге-
номе и способствует решению ряда важ-
ных практических задач:
1)
установление филогенетических взаи-
моотношений между культурными и
дикорастущими видами — донорами
ценных признаков;
2)
оценка родительских генотипов и гиб-
ридов, подбор для скрещиваний гене-
тически дивергентных пар;
3)
выявление наличия или отсутствия
аллеля, хромосомы, гена
;
интрогрес-
сии сцепленных аллелей, контроли-
рующих количественные признаки;
4)
использование в молекулярной таксо-
номии, для определения степени род-
ства инбредных линий гибридов при
эффекте гетерозиса;
5)
применение в работе с мировыми ге-
нетическими ресурсами растений для
регистрации и обеспечения их со-
хранности; охрана авторских прав на
источники и формы из генетических
коллекций;
6)
идентификация сортов и генотипов в
селекции, семеноводстве и семенном
контроле.
В настоящее время известны различ-
ные модификации ПЦР
-
технологии в за-
висимости от природы используемых
праймеров и способа идентификации
полученных фрагментов амплифициро-
ванной ДНК. Одна из первых методик
получила название
RAPD (
полиморфизм
рандомно амплифицированных фраг-
Э
лектронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека