Table of Contents Table of Contents
Previous Page  36 / 68 Next Page
Information
Show Menu
Previous Page 36 / 68 Next Page
Page Background

äîâ — îðãàíè÷åñêèõ ñîåäèíåíèé, ñîñòîÿùèõ èç óãëå-

âîäíîãî (ïèðàíîçèäíîãî èëè ôóðàíîçèäíîãî) îñòàò-

êà è íåóãëåâîäíîãî ôðàãìåíòà (àãëèêîíà), ñîåäè-

íåííûõ ñëîæíîýôèðíîé ñâÿçüþ. Ïðè èõ âûäåëåíèè

ïðîèñõîäèò ãèäðîëèç èõ ñîñòàâëÿþùèõ, à ïðåïàðàòû

íà èõ îñíîâå ñîäåðæàò òîëüêî õèíîíû, êîòîðûå ÿâ-

ëÿþòñÿ íîñèòåëÿìè áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíî-ñòè.

Íàèáîëåå èçâåñòíûå áèîëîãè÷åñêèå ýôôåêòû ïðè-

ðîäíûõ õèíîèäîâ — ìåìáðàíîñòàáèëèçèðóþùèå,

ïðîòèâîìèêðîáíûå è ïðîòèâîâîñïàëèòåëüíûå [7, 8].

Èçâåñòíû òðè îñíîâíûå ãðóïïû ñîåäèíåíèé: ãèäðî-

õèíîíû, íàôòîõèíîíû è àíòðîõèíîíû [9]. Ïðåîá-

ëàäàþùåå áîëüøèíñòâî èç íèõ íàéäåíî â ðàñòåíèÿõ.

Íàèáîëåå èçâåñòíûå ïðåäñòàâèòåëè õèíîèäîâ æè-

âîòíîãî ïðîèñõîæäåíèÿ — ìèðàîõèíîõðîìû èç ïàí-

öèðÿ ìîðñêèõ åæåé, íà îñíîâå êîòîðûõ ñîçäàí ïðå-

ïàðàò «Ãèñòîõðîì» [10, 11].

Öåëè äàííîé ðàáîòû — ðàçðàáîòêà ìåòîäîâ ýêñ-

òðàêöèè ãèäðîõèíîíîâ â âèäå êîíöåíòðèðîâàííûõ

è ñòàáèëüíûõ ïðåïàðàòîâ, ìîäèôèêàöèÿ ìåòîäîâ

êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ öåëåâûõ êîìïîíåí-

òîâ ïðèìåíèòåëüíî ê èñòî÷íèêó ñûðüÿ, à òàêæå îï-

ðåäåëåíèå àíòèìèêðîáíûõ ñâîéñòâ ýêñòðàêòîâ ïðè

ïðîèçâîäñòâå ôàðøåâûõ èçäåëèé.

Îáúåêòîì èññëåäîâàíèé ñëóæèë äâóñòâîð÷àòûé

ìîëëþñê êîðáèêóëà ÿïîíñêàÿ (

Corbicula japonica

),

äîáûòàÿ â çàëèâå Ïåòðà Âåëèêîãî (ßïîíñêîå ìîðå),

çàìîðîæåííàÿ ïðè –18 °Ñ. Äëÿ ïðîâåäåíèÿ ýêñïåðè-

ìåíòàëüíûõ ðàáîò ñûðüå ðàçìîðàæèâàëè, ïðîìûâà-

ëè, îòäåëÿëè ìÿãêèå òêàíè, èçìåëü÷àëè è ñóáëè-

ìèðîâàëè. Äëÿ ñóáëèìèðîâàíèÿ ôàðø êîðáèêóëû

ðàñêëàäûâàëè íà ïðîòèâíÿõ ñëîåì íå âûøå 1 ñì,

ïîñëå ÷åãî çàìîðàæèâàëè ïðè òåìïåðàòóðå –45 °Ñ

â òå÷åíèå ñóòîê. Ïðîäîëæèòåëüíîñòü ñóøêè ñîñòà-

âèëà 12 ÷, êîíå÷íàÿ òåìïåðàòóðà –35 °Ñ.

Ýêñòðàêöèþ õèíîèäíûõ ñîåäèíåíèé ïðîâîäèëè

ýòèëîâûì ñïèðòîì è ïîäñîëíå÷íûì ìàñëîì ïðè ðàç-

íûõ ñîîòíîøåíèÿõ ñûðüÿ è ýêñòðàãåíòà, âàðüèðóÿ

âðåìÿ è òåìïåðàòóðó ýêñòðàêöèè. Ýôôåêòèâíîñòü

ýêñòðàêöèè îöåíèâàëè ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêè ïî

ïðèðîñòó îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè ïðè 262 íì (ñïèðòî-

âûå ýêñòðàêòû) è 290 íì (ìàñëÿíûå ýêñòðàêòû) [12].

Äëÿ îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâåííîãî ñîäåðæàíèÿ

õèíîèäíûõ ñîåäèíåíèé èñïîëüçîâàëè ìåòîä ÂÝÆÕ,

ðåêîìåíäîâàííûé Ìèíçäðàâîì Ðîññèè äëÿ óñòà-

íîâëåíèÿ ñîäåðæàíèÿ ãèäðîõèíîíîâ â ÁÀÄ ê ïèùå

[13]. Ìåòîä â ÷àñòè âûäåëåíèÿ ñóììàðíîãî ýêñòðàê-

òà áûë ìîäèôèöèðîâàí ïðèìåíèòåëüíî ê ñûðüåâîìó

èñòî÷íèêó. Èäåíòèôèêàöèþ è êîëè÷åñòâåííîå îï-

ðåäåëåíèå ïðîâîäèëè íà æèäêîñòíîì õðîìàòîãðàôå

«Shimadzu LC-6A» (ßïîíèÿ) ñ êîëîíêîé Zorbax ODS

(4,6

×

250 ìì, 5 ìêì, DuPont, ÑØÀ) è ïðåäêîëîíêîé

Shim-Pack FLC-ODS (4,6

×

50 ìì, 3 ìêì, «Shimadzu»,

ßïîíèÿ). Ýëþöèþ ïðîâîäèëè àöåòîíèòðèëîì ñî

ñêîðîñòüþ ïîòîêà 3 ìë/ìèí ïðè òåìïåðàòóðå êîëîí-

êè 55 °Ñ. Õðîìàòîãðàôè÷åñêèé ñèãíàë ðåãèñòðèðî-

âàëè ñ ïîìîùüþ ÓÔ-äåòåêòîðà íà äèîäíîé ìàòðèöå

SPD-M6A («Shimadzu», ßïîíèÿ).

Êîìïîíåíòû èäåíòèôèöèðîâàëè ïî âðåìåíè

óäåðæèâàíèÿ è ÓÔ-ñïåêòðàì êîìïîíåíòîâ õëîðî-

ôîðìíîãî ýêñòðàêòà êîðáèêóëû. Ðàñ÷åò êîíöåíòðà-

öèè îñóùåñòâëÿëè ïî êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé, ïîëó-

÷åííîé ïî ñóììàðíûì õèíîèäíûì êîìïîíåíòàì

õëîðîôîðìíîãî ýêñòðàêòà êîðáèêóëû. Ñðåäíåå çíà-

÷åíèå îïðåäåëåíèÿ ñîñòàâèëî 92,4 %, ñòàíäàðòíîå

îòêëîíåíèå — 4,23 %.

Ïðåäâàðèòåëüíàÿ ïîäãîòîâêà ïðîá âêëþ÷àëà íå-

ñêîëüêî ýòàïîâ è çàâèñèëà îò òèïà ýêñòðàãåíòà. Îá-

ðàçåö ñïèðòîâîãî ýêñòðàêòà (4–5 ìë) óïàðèâàëè â âà-

êóóìå ïðè òåìïåðàòóðå 30...45 °Ñ äî ïîÿâëåíèÿ îïà-

ëåñöåíöèè. Ïîñëå ÷åãî â îáðàçåö äîáàâëÿëè 10 ìë âî-

äû è 3 ìë õëîðîôîðìà, òùàòåëüíî ïåðåìåøèâàëè â

òå÷åíèå 20 ìèí íà ìàãíèòíîé ìåøàëêå. Ïîñëå ðàñ-

ñëîåíèÿ õëîðîôîðìíûé ñëîé îòäåëÿëè. Âîäíûé ñëîé

äâàæäû ýêñòðàãèðîâàëè õëîðîôîðìîì (2

×

3 ìë). Õëî-

ðîôîðìíûå ñëîè îáúåäèíÿëè, ñóøèëè íàä áåçâîä-

íûì ñóëüôàòîì íàòðèÿ, óïàðèâàëè â âàêóóìå äî ïî-

ñòîÿííîãî âåñà. Ñóõîé îñòàòîê ðàñòâîðÿëè â 200 ìêë

ñèñòåìû ðàñòâîðèòåëåé õëîðîôîðì–ýòàíîë â îáúåì-

íîì ñîîòíîøåíèè 1:1. Àëèêâîòó àíàëèçèðîâàëè âû-

ñîêîýôôåêòèâíîé æèäêîñòíîé õðîìàòîãðàôèåé.

Îáðàçåö ìàñëÿíîãî ýêñòðàêòà (0,5 ìë) íàíîñèëè

íà ïàòðîí ñ îáðàùåííîé ôàçîé ENVI-C18. Õèíîèä-

íûå ñîåäèíåíèÿ ýëþèðîâàëè àöåòîíèòðèëîì (2 ìë).

Ýëþàò óïàðèâàëè â âàêóóìå äî ïîñòîÿííîé ìàññû.

Ñóõîé îñòàòîê ðàñòâîðÿëè â 50 ìêë ñèñòåìû ðàñòâî-

ðèòåëåé õëîðîôîðì–ýòàíîë â îáúåìíîì ñîîòíîøå-

íèè 1:1. Àëèêâîòó àíàëèçèðîâàëè âûñîêîýôôåêòèâ-

íîé æèäêîñòíîé õðîìàòîãðàôèåé.

Ëèïèäû ýêñòðàãèðîâàëè ìåòîäîì Ôîë÷à [14].

Æèðíûå êèñëîòû (ÆÊ) àíàëèçèðîâàëè íà ãàçîæèä-

êîñòíîì õðîìàòîãðàôå «Shimadzu GC-16A» (ßïî-

íèÿ) ñ ïëàìåííî-èîíèçàöèîííûì äåòåêòîðîì, ñíàá-

æåííûì êàïèëëÿðíîé êîëîíêîé (30,0 ì

×

0,3 ìì) ñ

ôàçîé Supelcowax-10 ïðè òåìïåðàòóðå 190 °Ñ. Äëÿ

ýòîãî ÆÊ ïåðåâîäèëè â ôîðìó ìåòèëîâûõ ýôèðîâ

[15] è èäåíòèôèöèðîâàëè ïî èíäåêñàì Êîâà÷à [16].

Êîíöåíòðàöèþ ÆÊ ðàññ÷èòûâàëè ñ ïîìîùüþ áàçû

îáðàáîòêè äàííûõ C-R4A Chromatopac.

Êîëè÷åñòâî âíîñèìîãî â ýêñïåðèìåíòàëüíûå îá-

ðàçöû ýêñòðàêòà êîðáèêóëû ðàññ÷èòûâàëè èñõîäÿ èç

ðåêîìåíäàöèé Èíñòèòóòà ïèòàíèÿ. Îíî ñîñòàâèëî

10 ìë ýêñòðàêòà (ïðè êîíöåíòðàöèè 3 ìã/ìë) íà 1 êã

ôàðøà ñîñèñîê. Êîíòðîëüíûé îáðàçåö ñîñèñîê áûë

ïðèãîòîâëåí ïî ñòàíäàðòíîé ðåöåïòóðå: íà ïåðâîé

ñòàäèè èçìåëü÷àëè ãîâÿäèíó (35 %), äîáàâëÿëè êîì-

ïëåêñíûå ôîñôàòñîäåðæàùèå äîáàâêè (íå áîëåå

0,4 %), ðàñòâîð íèòðèòà íàòðèÿ äëÿ îáðàçîâàíèÿ òè-

ïè÷íîãî ðîçîâîãî öâåòà ïðîäóêòà (íå áîëåå 0,005 %),

÷àñòü âîäû (ëüäà) äëÿ îõëàæäåíèÿ ôàðøà ïî ðåöåï-

òóðå. Íà âòîðîé ñòàäèè âíîñèëè ïîëóæèðíóþ èç-

ìåëü÷åííóþ ñâèíèíó (60 %), îñòàâøååñÿ êîëè÷åñò-

âî âîäû. Íà òðåòüåé ñòàäèè âíîñèëè ñóõîå ìîëîêî

(5 %), ñîëü (íå áîëåå 2,3 %) è êóòòåðîâàëè ôàðø äî

ãîòîâíîñòè (òåìïåðàòóðà ãîòîâîãî ôàðøà 12 °Ñ).

Ìàñëÿíûé ýêñòðàêò êîðáèêóëû äîáàâëÿëè â ôàðø

ñîñèñîê íà ïîñëåäíåé (òðåòüåé) ñòàäèè â ïðîöåññå

åãî èçìåëü÷åíèÿ â êóòòåðå (èññëåäóåìûå îáðàçöû).

Âñå ôàðøè èññëåäóåìûõ îáðàçöîâ áûëè íàáèòû â

ïðîíèöàåìóþ ñîñèñî÷íóþ îáîëî÷êó «Àìèëþêñ» è

34

ХРАНЕНИЕ И ПЕРЕРАБОТКА СЕЛЬХОЗСЫРЬЯ, № 1, 2012

Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека