äîâ — îðãàíè÷åñêèõ ñîåäèíåíèé, ñîñòîÿùèõ èç óãëå-
âîäíîãî (ïèðàíîçèäíîãî èëè ôóðàíîçèäíîãî) îñòàò-
êà è íåóãëåâîäíîãî ôðàãìåíòà (àãëèêîíà), ñîåäè-
íåííûõ ñëîæíîýôèðíîé ñâÿçüþ. Ïðè èõ âûäåëåíèè
ïðîèñõîäèò ãèäðîëèç èõ ñîñòàâëÿþùèõ, à ïðåïàðàòû
íà èõ îñíîâå ñîäåðæàò òîëüêî õèíîíû, êîòîðûå ÿâ-
ëÿþòñÿ íîñèòåëÿìè áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíî-ñòè.
Íàèáîëåå èçâåñòíûå áèîëîãè÷åñêèå ýôôåêòû ïðè-
ðîäíûõ õèíîèäîâ — ìåìáðàíîñòàáèëèçèðóþùèå,
ïðîòèâîìèêðîáíûå è ïðîòèâîâîñïàëèòåëüíûå [7, 8].
Èçâåñòíû òðè îñíîâíûå ãðóïïû ñîåäèíåíèé: ãèäðî-
õèíîíû, íàôòîõèíîíû è àíòðîõèíîíû [9]. Ïðåîá-
ëàäàþùåå áîëüøèíñòâî èç íèõ íàéäåíî â ðàñòåíèÿõ.
Íàèáîëåå èçâåñòíûå ïðåäñòàâèòåëè õèíîèäîâ æè-
âîòíîãî ïðîèñõîæäåíèÿ — ìèðàîõèíîõðîìû èç ïàí-
öèðÿ ìîðñêèõ åæåé, íà îñíîâå êîòîðûõ ñîçäàí ïðå-
ïàðàò «Ãèñòîõðîì» [10, 11].
Öåëè äàííîé ðàáîòû — ðàçðàáîòêà ìåòîäîâ ýêñ-
òðàêöèè ãèäðîõèíîíîâ â âèäå êîíöåíòðèðîâàííûõ
è ñòàáèëüíûõ ïðåïàðàòîâ, ìîäèôèêàöèÿ ìåòîäîâ
êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ öåëåâûõ êîìïîíåí-
òîâ ïðèìåíèòåëüíî ê èñòî÷íèêó ñûðüÿ, à òàêæå îï-
ðåäåëåíèå àíòèìèêðîáíûõ ñâîéñòâ ýêñòðàêòîâ ïðè
ïðîèçâîäñòâå ôàðøåâûõ èçäåëèé.
Îáúåêòîì èññëåäîâàíèé ñëóæèë äâóñòâîð÷àòûé
ìîëëþñê êîðáèêóëà ÿïîíñêàÿ (
Corbicula japonica
),
äîáûòàÿ â çàëèâå Ïåòðà Âåëèêîãî (ßïîíñêîå ìîðå),
çàìîðîæåííàÿ ïðè –18 °Ñ. Äëÿ ïðîâåäåíèÿ ýêñïåðè-
ìåíòàëüíûõ ðàáîò ñûðüå ðàçìîðàæèâàëè, ïðîìûâà-
ëè, îòäåëÿëè ìÿãêèå òêàíè, èçìåëü÷àëè è ñóáëè-
ìèðîâàëè. Äëÿ ñóáëèìèðîâàíèÿ ôàðø êîðáèêóëû
ðàñêëàäûâàëè íà ïðîòèâíÿõ ñëîåì íå âûøå 1 ñì,
ïîñëå ÷åãî çàìîðàæèâàëè ïðè òåìïåðàòóðå –45 °Ñ
â òå÷åíèå ñóòîê. Ïðîäîëæèòåëüíîñòü ñóøêè ñîñòà-
âèëà 12 ÷, êîíå÷íàÿ òåìïåðàòóðà –35 °Ñ.
Ýêñòðàêöèþ õèíîèäíûõ ñîåäèíåíèé ïðîâîäèëè
ýòèëîâûì ñïèðòîì è ïîäñîëíå÷íûì ìàñëîì ïðè ðàç-
íûõ ñîîòíîøåíèÿõ ñûðüÿ è ýêñòðàãåíòà, âàðüèðóÿ
âðåìÿ è òåìïåðàòóðó ýêñòðàêöèè. Ýôôåêòèâíîñòü
ýêñòðàêöèè îöåíèâàëè ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêè ïî
ïðèðîñòó îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè ïðè 262 íì (ñïèðòî-
âûå ýêñòðàêòû) è 290 íì (ìàñëÿíûå ýêñòðàêòû) [12].
Äëÿ îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâåííîãî ñîäåðæàíèÿ
õèíîèäíûõ ñîåäèíåíèé èñïîëüçîâàëè ìåòîä ÂÝÆÕ,
ðåêîìåíäîâàííûé Ìèíçäðàâîì Ðîññèè äëÿ óñòà-
íîâëåíèÿ ñîäåðæàíèÿ ãèäðîõèíîíîâ â ÁÀÄ ê ïèùå
[13]. Ìåòîä â ÷àñòè âûäåëåíèÿ ñóììàðíîãî ýêñòðàê-
òà áûë ìîäèôèöèðîâàí ïðèìåíèòåëüíî ê ñûðüåâîìó
èñòî÷íèêó. Èäåíòèôèêàöèþ è êîëè÷åñòâåííîå îï-
ðåäåëåíèå ïðîâîäèëè íà æèäêîñòíîì õðîìàòîãðàôå
«Shimadzu LC-6A» (ßïîíèÿ) ñ êîëîíêîé Zorbax ODS
(4,6
×
250 ìì, 5 ìêì, DuPont, ÑØÀ) è ïðåäêîëîíêîé
Shim-Pack FLC-ODS (4,6
×
50 ìì, 3 ìêì, «Shimadzu»,
ßïîíèÿ). Ýëþöèþ ïðîâîäèëè àöåòîíèòðèëîì ñî
ñêîðîñòüþ ïîòîêà 3 ìë/ìèí ïðè òåìïåðàòóðå êîëîí-
êè 55 °Ñ. Õðîìàòîãðàôè÷åñêèé ñèãíàë ðåãèñòðèðî-
âàëè ñ ïîìîùüþ ÓÔ-äåòåêòîðà íà äèîäíîé ìàòðèöå
SPD-M6A («Shimadzu», ßïîíèÿ).
Êîìïîíåíòû èäåíòèôèöèðîâàëè ïî âðåìåíè
óäåðæèâàíèÿ è ÓÔ-ñïåêòðàì êîìïîíåíòîâ õëîðî-
ôîðìíîãî ýêñòðàêòà êîðáèêóëû. Ðàñ÷åò êîíöåíòðà-
öèè îñóùåñòâëÿëè ïî êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé, ïîëó-
÷åííîé ïî ñóììàðíûì õèíîèäíûì êîìïîíåíòàì
õëîðîôîðìíîãî ýêñòðàêòà êîðáèêóëû. Ñðåäíåå çíà-
÷åíèå îïðåäåëåíèÿ ñîñòàâèëî 92,4 %, ñòàíäàðòíîå
îòêëîíåíèå — 4,23 %.
Ïðåäâàðèòåëüíàÿ ïîäãîòîâêà ïðîá âêëþ÷àëà íå-
ñêîëüêî ýòàïîâ è çàâèñèëà îò òèïà ýêñòðàãåíòà. Îá-
ðàçåö ñïèðòîâîãî ýêñòðàêòà (4–5 ìë) óïàðèâàëè â âà-
êóóìå ïðè òåìïåðàòóðå 30...45 °Ñ äî ïîÿâëåíèÿ îïà-
ëåñöåíöèè. Ïîñëå ÷åãî â îáðàçåö äîáàâëÿëè 10 ìë âî-
äû è 3 ìë õëîðîôîðìà, òùàòåëüíî ïåðåìåøèâàëè â
òå÷åíèå 20 ìèí íà ìàãíèòíîé ìåøàëêå. Ïîñëå ðàñ-
ñëîåíèÿ õëîðîôîðìíûé ñëîé îòäåëÿëè. Âîäíûé ñëîé
äâàæäû ýêñòðàãèðîâàëè õëîðîôîðìîì (2
×
3 ìë). Õëî-
ðîôîðìíûå ñëîè îáúåäèíÿëè, ñóøèëè íàä áåçâîä-
íûì ñóëüôàòîì íàòðèÿ, óïàðèâàëè â âàêóóìå äî ïî-
ñòîÿííîãî âåñà. Ñóõîé îñòàòîê ðàñòâîðÿëè â 200 ìêë
ñèñòåìû ðàñòâîðèòåëåé õëîðîôîðì–ýòàíîë â îáúåì-
íîì ñîîòíîøåíèè 1:1. Àëèêâîòó àíàëèçèðîâàëè âû-
ñîêîýôôåêòèâíîé æèäêîñòíîé õðîìàòîãðàôèåé.
Îáðàçåö ìàñëÿíîãî ýêñòðàêòà (0,5 ìë) íàíîñèëè
íà ïàòðîí ñ îáðàùåííîé ôàçîé ENVI-C18. Õèíîèä-
íûå ñîåäèíåíèÿ ýëþèðîâàëè àöåòîíèòðèëîì (2 ìë).
Ýëþàò óïàðèâàëè â âàêóóìå äî ïîñòîÿííîé ìàññû.
Ñóõîé îñòàòîê ðàñòâîðÿëè â 50 ìêë ñèñòåìû ðàñòâî-
ðèòåëåé õëîðîôîðì–ýòàíîë â îáúåìíîì ñîîòíîøå-
íèè 1:1. Àëèêâîòó àíàëèçèðîâàëè âûñîêîýôôåêòèâ-
íîé æèäêîñòíîé õðîìàòîãðàôèåé.
Ëèïèäû ýêñòðàãèðîâàëè ìåòîäîì Ôîë÷à [14].
Æèðíûå êèñëîòû (ÆÊ) àíàëèçèðîâàëè íà ãàçîæèä-
êîñòíîì õðîìàòîãðàôå «Shimadzu GC-16A» (ßïî-
íèÿ) ñ ïëàìåííî-èîíèçàöèîííûì äåòåêòîðîì, ñíàá-
æåííûì êàïèëëÿðíîé êîëîíêîé (30,0 ì
×
0,3 ìì) ñ
ôàçîé Supelcowax-10 ïðè òåìïåðàòóðå 190 °Ñ. Äëÿ
ýòîãî ÆÊ ïåðåâîäèëè â ôîðìó ìåòèëîâûõ ýôèðîâ
[15] è èäåíòèôèöèðîâàëè ïî èíäåêñàì Êîâà÷à [16].
Êîíöåíòðàöèþ ÆÊ ðàññ÷èòûâàëè ñ ïîìîùüþ áàçû
îáðàáîòêè äàííûõ C-R4A Chromatopac.
Êîëè÷åñòâî âíîñèìîãî â ýêñïåðèìåíòàëüíûå îá-
ðàçöû ýêñòðàêòà êîðáèêóëû ðàññ÷èòûâàëè èñõîäÿ èç
ðåêîìåíäàöèé Èíñòèòóòà ïèòàíèÿ. Îíî ñîñòàâèëî
10 ìë ýêñòðàêòà (ïðè êîíöåíòðàöèè 3 ìã/ìë) íà 1 êã
ôàðøà ñîñèñîê. Êîíòðîëüíûé îáðàçåö ñîñèñîê áûë
ïðèãîòîâëåí ïî ñòàíäàðòíîé ðåöåïòóðå: íà ïåðâîé
ñòàäèè èçìåëü÷àëè ãîâÿäèíó (35 %), äîáàâëÿëè êîì-
ïëåêñíûå ôîñôàòñîäåðæàùèå äîáàâêè (íå áîëåå
0,4 %), ðàñòâîð íèòðèòà íàòðèÿ äëÿ îáðàçîâàíèÿ òè-
ïè÷íîãî ðîçîâîãî öâåòà ïðîäóêòà (íå áîëåå 0,005 %),
÷àñòü âîäû (ëüäà) äëÿ îõëàæäåíèÿ ôàðøà ïî ðåöåï-
òóðå. Íà âòîðîé ñòàäèè âíîñèëè ïîëóæèðíóþ èç-
ìåëü÷åííóþ ñâèíèíó (60 %), îñòàâøååñÿ êîëè÷åñò-
âî âîäû. Íà òðåòüåé ñòàäèè âíîñèëè ñóõîå ìîëîêî
(5 %), ñîëü (íå áîëåå 2,3 %) è êóòòåðîâàëè ôàðø äî
ãîòîâíîñòè (òåìïåðàòóðà ãîòîâîãî ôàðøà 12 °Ñ).
Ìàñëÿíûé ýêñòðàêò êîðáèêóëû äîáàâëÿëè â ôàðø
ñîñèñîê íà ïîñëåäíåé (òðåòüåé) ñòàäèè â ïðîöåññå
åãî èçìåëü÷åíèÿ â êóòòåðå (èññëåäóåìûå îáðàçöû).
Âñå ôàðøè èññëåäóåìûõ îáðàçöîâ áûëè íàáèòû â
ïðîíèöàåìóþ ñîñèñî÷íóþ îáîëî÷êó «Àìèëþêñ» è
34
ХРАНЕНИЕ И ПЕРЕРАБОТКА СЕЛЬХОЗСЫРЬЯ, № 1, 2012
Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека