ЭлБиб

ПИЩЕВАЯ ПРОМЫШЛЕННОСТЬ

1/2009

QUALITY AND SAFETY

Первые случаи появления следов

меламина, циануровой кислоты и их

комплексов в кормах для животных,

пшеничной клейковине и других бел-

ковых пищевых ингредиентах выявле-

ны в 2007 г. Распространившиеся тогда

болезни и смертность среди домашних

животных, как впоследствии было до-

казано, были результатом формирова-

ния меламин-циануритовых кристал-

лов в почках. Ситуация обострилась,

когда в Китае попали в продажу детс-

кие сухие смеси, загрязненные мела-

мином, что привело к массовому забо-

леванию детей в этой стране.

С целью обеспечения безопасности

во многих странах начались разработ-

ки методик по определению меламина

в молочных продуктах, тканях рыб и

животных, кормах для животных и во

многих других продуктах, содержащих

белки.

Когда возникли первые тяжелые слу-

чаи отравлений меламином, специаль-

ных методов определения этого опас-

ного вещества не было. Тогда не суще-

ствовало подробной аналитической

процедуры и поначалу использовали

общие хроматографические обращен-

но-фазовые методы анализа. Оказа-

лось, что меламин и циануровую кис-

лоту сложно анализировать подобны-

ми методами из-за высокого содержа-

ния атомов азота, высокой полярности

и гидрофильности этих веществ. Осо-

бенно осложнялся анализ на колонках

ODS или C-18, которые сейчас широко

используют химики-аналитики. Это по-

чти неосуществимо технически, по-

скольку использование колонок ODS и

C-18 при таких анализах требует до-

бавления в качестве реагента сульфо-

новых кислот, которые несовместимы с

высокочувствительным масс-спектро-

метрическим детектированием.

Более грубые ВЭЖХ-детекторы, та-

кие, как диодно-матричный или УФ-

спектрофотометрический, позволяют

применять сульфоновые кислоты, но

их чувствительность мала – всего лишь

1–2 мкг/мл. Поскольку опасными явля-

ются уже в сотни раз меньшие концент-

рации меламина, эти приборы со сво-

ей задачей тоже не справлялись. На-

чать же применение высокочувстви-

тельного метода ВЭЖХ-МС для опре-

Метод определения меламина

и циануровой кислоты

проверен на практике

деления меламина не удавалось до тех

пор, пока не были полностью исключе-

ны сульфокислоты из состава подвиж-

ных фаз.

Выход из положения был найден

после принятия решения об отказе от

классических колонок ODS и C-18 в

пользу сорбентов ZIC®–HILIC* нового

поколения. Разделение полярных ве-

ществ, таких, как меламин и циануро-

вая кислота, идет на этих колонках го-

раздо лучше, чем на ODS и C-18.

Главное, что удалось реализовать

при переходе на колонки HILIC, – это

полное исключение сульфоновых

кислот из состава ПФ, что дало воз-

можность использования квадру-

польного детектора MS-MS и довело

чувствительность по обоим веще-

ствам до 0,025 мкг/мл. Именно тогда

высокая чувствительность квадру-

польного детектора MS-MS позволи-

ла полностью выявлять любую мела-

миновую опасность пищевых продук-

тов.

Сегодня этот метод хорошо отрабо-

тан и проверен на практике рядом ав-

торитетных организаций. Наиболее

значимые среди них – Управление по

продовольствию и медикаментам США

(US FDA) и Министерство здравоохра-

нения, труда и социального обеспече-

ния Японии (JMH LW). Полный текст

методик контроля меламина и циану-

ровой кислоты в молочных продуктах,

мясе и рыбе доступен в Интернете по

адресу:

www.merck.ru

. Этот метод мо-

жет быть воспроизведен в том или

ином виде любой пищевой и ветери-

нарной лабораторией, а также лабо-

раториями контроля качества. На мо-

мент публикации статьи – он един-

ственный, который позволяет одно-

временно определять меламин и циа-

нуровую кислоту с чувствительностью

0,025 мкг/мл.

В вышеописанном методе использу-

ется дорогостоящий квадрупольный

масс-спектроскопический детектор,

которым оснащены пока еще не все ла-

боратории. В то же время среди анали-

тиков весьма популярны УФ-спектро-

метрические и диодно-матричные де-

текторы благодаря их низкой стоимос-

ти, а также универсальности. Как ока-

залось, новая технология HILIC замеча-

тельно работает и с этими распростра-

ненными детекторами. Простая замена

колонок C-18 на ZIC®-HILIC позволяет

повысить чувствительность по мела-

мину почти на порядок (с 2 до 0,5 мкг/

мл) и значительно упростить пробо-

подготовку. Так удается легко адапти-

ровать и расширить описанный метод

ценой небольшого падения чувстви-

тельности.

Таким образом, применение цвит-

тер-ионной HILIC-хроматографии в

сочетании с МС- или УФ-детектиро-

ванием – это самый точный, простой

и доступный способ определения ме-

ламина и циануровой кислоты. При

использовании специальных сорбен-

тов становится возможным разделе-

ние даже очень полярных и гидро-

фильных веществ без ион-парных

реагентов. На рис. 1 показано, что

представляет собой такой сорбент,

из рис. 2 видно, как происходят гид-

рофильные и электростатические

взаимодействия с ним анализируе-

мых веществ.

А. МОИСЕЕВ,

специалист Представительства

фирмы «Мерк КГаА» в Москве

Рис. 2. Схема гидрофильных и электростатических

взаимодействий с сорбентом HILIC

Рис. 1. Функциональная группа

сорбента ZIC

-HILIC

Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека