ЭлБиб

теина, калия или других химических элементов (Gu, Weeden, Yu, Wal

lace, 1995). В большей степени этим условиям удовлетворяют методы,

основанные на ПЦР. Более того, интенсивные поисковые работы в этом

направлении привели к созданию принципиально нового метода ам

плификации фрагментов ДНК. В этом случае вместо традиционной по

лимеразной цепной реакции (ПЦР) в термоциклерах (приборы для по

становки ПЦР) используется метод геликаза-зависимой изотермической

амплификации ДНК (Helicase-dependent isothermal DNA amplification),

требующей несколько реактивов и инкубацию при 37 °С в течение од

ного-двух часов (Mariam Vincent, Yan Xu, Huimin Kong, 2004). Это су

щественно упрощает и удешевляет скрининг маркеров в расщепляю

щихся популяциях.

Для успешной работы в области ДНК-маркирования необходима

насыщенная генетическая карта на основе ДНК-маркеров. Для целого

ряда культурных видов, в том числе и клевера лугового, такие карты

уже созданы (Isobe et al., 2003, Sato et al., 2005, Herrmann et al., 2006).

Две из них принадлежат японско-российской творческой группе, вклю

чая сотрудников ВНИИ кормов им. В. Р. Вильямса, а третья — австрий

ским исследователям. При создании этих карт использовались различ

ные методы оценки ДНК-полиморфизма, основанные как на RFLP, так и

PCR.

В современной синтетической селекции очень часто стоит задача

улучшения уже районированного сорта лишь по одному из признаков.

В этом случае используется донор и специальная схема беккроссирова-

ния, чтобы перенести гены, ответственные за проявление селекционно

го признака и уменьшить долю ДНК-донора у нового сорта. В данном

случае MAS-селекция просто незаменима, так как позволяет контроли

ровать не только селекционный признак и даже не только группу сцеп

ления, в которой он находится, а полностью ДНК-донора и реципиента.

Конечно, это возможно лишь в случае, когда детально изучен полимор

физм ДНК обоих родителей.

Известен ряд схем MAS-селекции, которые отвечают сложности

генетического контроля, включая количество локусов, контролирующих

признак, а также их качественному состоянию — доминантному или

рецессивному. Наиболее рельефно преимущество маркер-вспомогатель-

ной селекции проявляется, когда акцептор имеет доминантные аллели

селектируемого признака, а донор — рецессивные (рис. 2). В этом слу

чае уже в первом же скрещивании мы лишаемся возможности визуально

контролировать рецессивные аллели донора. Хотя знаем, что все расте

ния Fi имеют генотип «Аа». Проведя первый беккросс, мы создаем по

пуляцию из генотипов «Аа» и «Аа», которые фенотипически неотличи

мы. При традиционных методах оценки нам пришлось бы проводить

247

Научная электронная библиотека ЦНСХБ