251 / 294
ДНК-МАРКЕРЫ В СЕЛЕКЦИИ КЛЕВЕРА ЛУЕОВОГО
Н. Н. Козлов, И. А. Клименко
В с ер о с с и й с ки й н а у ч н о -и с с л ед о ват е л ь с к и й ин ст ит ут к о рм о в им ени
В. В. В и л ь ям с а Р о с с и й с к о й а к а д ем и и с е л ь с к о хо зя й ст в е н ны х наук , Р о с с и я
Во второй половине прошлого века широким фронтом начались
исследования молекулярных основ наследственности. Интенсивная ра
бота в этом направлении дала положительные результаты. В 50-х годах
были разработаны методы, позволяющие определять последователь
ность аминокислот в полипептидной цепи белков и восстанавливать на
этой основе нуклеотидную последовательность транскрибируемой
ДНК. А с появлением прямых методов ферментативного секвенирова-
ния ДНК, предложенных М. Сингер в 1975-1977 гг. (Сингер, Берг,
1998), позволили автоматизировать эту операцию. В 1980 г. был разра
ботан метод для оценки полиморфизма ДНК, получивший название
RFLP (restriction fragments length polymorphism) (Botstein, White, Skoh-
nick, et al., 1980). С использованием этого метода было установлено, что
растения имеют Ю
8
-Ю
10
нуклеотидов ДНК с огромным полиморфиз
мом, который может быть положен в основу создания ДНК-маркеров и
насыщенных генетических карт. Несколько позже, в 1983 г., американ
скими биохимиками во главе с К. В. Mullis (Mullis, Faloone, 1987) была
открыта полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это техника быстрого и
многократного увеличения небольших фрагментов ДНК. В настоящее
время на базе ПЦР создана плеяда методов, способных давать объек
тивную информацию о полиморфизме ДНК (Saha, Mian, Zwonitzer et al.,
2005). Цель этой процедуры — получение картинки с амплифицирован-
ными продуктами ДНК объектов исследования (рис, 1).
1 2 3 4 5
6
7
8
9 10 11 12
Рис. 1. Продукты амплификации ДНК с использованием SSR праймеров,
где 1, 2, 3 ... п— выборка растений из расщепляющейся популяции клевера
лугового; А и а — полиморфизм одного из локусов
Последние достижения в области ДНК-технологий послужили ба
зой для кардинального изменения ситуации в теоретической и практи
ческой селекции (Кочиева, 1999). Если в теоретическом плане маркиро-
245
Научная электронная библиотека ЦНСХБ