ЭлБиб

Кроме того, пели к о т роль рашития зародашей,.. поскольку было важно fie

допустить прорастания семян а песке, так как проросшие зародыши, погибали в

процессе стерилизации семян .при помещении н асептические условия. В

результате всхожесть обработанного материала

90%.

.Следующим этапом нашей работы был подбор оптимальных условий

стерилизации семян. Применение сильных стерилизующих агентов, таких как

гипохлорид натрия, сулема, диаиид, обеспечивало соблюдение асептических

условии, однако приводило к гибели, порядка 75% зародышей, несмотря на то, что

семядоли не.удалялись. Поэтому нами была разработана мягкая поэтапная схема

стерилизации. Извлеченные из песка семена промывали в слабом растворе

перманганата калия и в ламинарном боксе на 1 мин помещали в 70%-ный раствор

этилового спирта. Затем на стерильной подложке очищали семена от семенной

оболочки и снова на 2-3 секунды окунали в 70%-ный раствор спирта. Далее

промывали их автоклавированной дистиллированной водой и в асептических

условиях отделяли зрелые зародыши от семядолей. Обработанные таким образом

зародыши помещали на питательную среду Мурасиге и Скуга без гормональных

добавок, где они культивировались в

i c m h o i c

при

; 25-26'С в течение 2-х

педель. Тронувшиеся в рост зародыши переносили на среду для инициации

каллусообразопання следующего состава: MS + 2.4-1) и культивировали при t

25-26*4.' в темноте. Через десять дней начал образовываться белый рыхлый

каллус, который отделяли от экенланта и переносили на ранее подобранную

питательную среду для дальнейшего пассирования (Мигранова и др., 1997а).

Особенностью каллусообразования на -зародышах было практически полное

отсутствие выделения полифенолов. Эго является большой проблемой при

получении каллусов из листьев, корней и сердцевинной паренхимы борца

северного. Следует, однако отметить, что ранее нами было показано,

что

при

индукции каллусообразования из этих органов также можно избежать обильного

выделения молифенолов если использовать растения на ранних этапах вегетации

(Мигранова и др., 19976). Тем fie менее, при дальнейшем пассировании все же

527

Научная электронная библиотека ЦНСХБ