221 / 604
что и стало целью наших исследований.
В работе использовали ВЧП штамм ВНИИВВиМ
-8 8
на
уровне 7 -9 пассажа с инфекционной активностью 4,0-4,5
IgTimso/cM3, адаптированный к перевиваемым клеткам почки
зеленой мартышки CV-1. В работе также использовались пере*
виваемые культуры клеток почки зеленой мартышки (Vero) и
почки эмбриона африканской козы (ПЭАК). Клетки выращивали
в монослое в стеклянных матрасах емкостью 0,05-1,5 дм
3
и рол-
лерных бутылях емкостью 3,0 дм3. Вирус вносили в клеточные
культуры множественностью 0,001-0,01 ТЦД/кл с контактом в
течение 60 мин при 37 С и культивировали на среде ИГЛА МЕМ с
5% сыворотки КРС в течение 48-120 часов при 37 С до выра
женного поражения 50-70% монослоя. Активность вируса опре
деляли титрованием в культуре клеток CV-1. Вирусное сырье
лиофильно высушивали с добавлением стабилизирующих сред на
основе сахаров и гидролизатов белков.
При проведении серии собственных опытов по адаптации
ВЧП к культурам клеток Vero и ПЭАК путем 5 перемежающихся
пассажей было отмечено значительное увеличение титра и со
кращение времени культивирования после одного пассажа в
культуре ПЭАК, Vero и последующего в культуре CV-1. На про
тяжении последующих пассажей значительного увеличения тит
ра вируса не отмечено. Дальнейшая работа была направлена на
применение этой особенности для получения производственного
вируса с повышенной инфекционной активностью. В качестве
контроля использовали вирусное сырье, полученное при прове
дении последовательных пассажей в культуре клеток CV-
1
.
Активность ВЧП в материале первого пассажа в культуре
клеток ПЭАК составила 4 ,0-4
,8
lgTIJUIso/cM3, в культуре клеток
Vero - 3,0-3,25 lgTIJUlso/cM3. Далее работа проводилась с ис
пользованием культуры клеток ПЭАК и CV-1. Вирусный матери
ал первого пассажа в культуре клеток ПЭАК использовали в ка
честве матричной расплодки для получения производственного
сырья в культуре клеток CV-1 в матрасах емкостью 1,5 дм3. Ак
тивность вирусного сырья в культуре клеток CV-1, полученного
с использованием вышеуказанной матричной расплодки вируса,
составила 4,5-5,25 IgTUflso/cM
3
при времени культивирования
48-55 часов. Активность вирусного сырья в контроле составила
4,0-4,5
I g T L U W c M 3
при времени культивирования 72-96 часов.
Для оценки возможности использования полученной мат
ричной расплодки в крупномасштабном культивировании прове
ли серию экспериментов по выращиванию ВЧП в роллерных бу
тылях объемом 3,0 дм3. В результате исследований не было от
217
Научная электронная библиотека ЦНСХБ