ЭлБиб

давно граничат со странами, стационарно неблагополучными по

блютангу. Однако особую актуальность проблема блютанга при

обрела после вспышки эпизоотии этой болезни среди овец впер

вые в Российской Федерации - в Забайкалье в 1993 году, когда

заболеваемость и летальность среди взрослых овец в течение

двух недель составила соответственно 58,3% и 66,3%.

Нами проведена работа по определению эпитопного спектра

структурных компонентов вируса блютанга, эпитопному карти

рованию полипептидов, изучению функциональной активности и

диагностического значения антигенных детерминантов структур

ных полипептидов возбудителей группы блютанга с целью опре

деления необходимой специфичности новых средств эпитопного

анализа антигенов вируса блютанга и разработке на их основе

новой схемы лабораторной дифференциальной диагностики блю

танга при моно-, и смешанных орбивирусных инфекциях, вы

званных близкородственными вирусами группы эпизоотической

геморрагической болезни (ЭГБ) и болезни Ибараки (БИ).

В этой статье сообщаются данные о получении 23 линий

гибридных клеток, стабильно секретирующих моноклональные

антитела (МА), обладающие специфичностью к антигенным де

терминантам вируса блютанга, обусловливающим его принад

лежность к соответствующей серогруппе.

Вирус блютанга 1, 2, 3,

, 12, 14, 16, 17 серотипов, вирус

ЭГБ 1 серотипа (шт. "Альберта') и 2 серотипа (шт. "Нью-Джер

си”), и вирус болезни Ибараки получены из лаборатории "Спра

вочная с музеем штаммов " ВНИИВВиМ. Указанные возбудители

прошли 4-9 пассажей на культуре клеток почки сибирского гор

ного козерога (ПСГК).

Препараты очищенного вируса блютанга для иммунизации

мышей-доноров иммунных спленоцитов получали по методике,

предложенной Vervoerd в нашей модификации.

Гибридизацию клеток проводили по методу, предложенному

Kohler & Milstein, в нашей модификации при помощи 50%-ного

раствора ПЭГ-1500.

Клонирование гибридных клеток проводили в 0,3%-ном ага

ре по методу Gooding.

Конъюгирование МА с пероксидазой проводили по модифи

цированному периодатному методу Tijssen.

Непрямым методом ТФ ИФА выявили 186 клонов гибри

дом, которые секретировали МА, реагирующие с антигеном ви

руса блютанга 16 серотипа, и не реагирующие с нормальным ан

тигеном. Из них 23 клона гибридом продуцировали МА, которые

реагировали с антигенами всех изученных серотипов вируса

блютанга и не реагировали с антигенами вируса ЭГБ и вируса БИ,

210

Научная электронная библиотека ЦНСХБ