170 / 604
Индикацию вируса арктического бешенства проводили ме
тодом полимеразной цепной реакции (ПЦР), с праймерами ком
плементарными N-гену, с последующим рестрикционным анализом
на основе подобранной эндонуклеазы рестрикции —Bam HI, ко
торая гидролизует ПЦР-продукты только изолятов арктического
бешенства (М.А. Наумкина, 1999).
При интрацеребральном заражении белых мышей 10%-ной
суспензией мозга животных вирус бешенства был выделен в 3
материалах
(2
получен
£»1
от песцов и
1
- от оленя).
С целью идентификации вируса бешенства была проведена
PH на мышам с использованием специфического глобулина ло
шади и ТФ ИФА с использованием моноклональных антител,
специфичных к нуклеопротеину вируса бешенства. В результате
наблюдалась полная нейтрализация вируса в PH и выявление
специфического антигена вируса болезни во всех трех материалах.
С целью идентификации арктического вируса бешенства бы
ла проведена полимеразная цепная реакция с последующим ре
стрикционным анализом ПЦР-продуктов. РНК вируса бешенства
выявлена в пробах головного мозга двух песцов и одного оленя.
Изучаемые изоляты были идентифицированы как вирус арктиче
ского бешенства.
Для изучения адаптационных характеристик выделенных
изолятов было проведено пассирование вируса в мозге белых
мышей на протяжении двух-трех пассажей и определена инфек
ционная активность (lg МЛД
50
/ мл). Результаты приведены в
таблице.
Таблица 1. Характеристика уличных изолятов вируса бе
шенства
Шифр
пробы
Инкубационный период
(сутки)
Инфекционная активность
(1е МЛД кп/мл)
I пассаж II пас
саж
III пас
саж
I пассаж II пас
саж
III пас
саж
R-]
14-15 12-15 14-15 .
23
2,5
2 ,8
R-2 1 15-17 12-23 11-15
3
3,8
4
R-3 27-35 25-29
2,5
2 ,6
*
Как показывают данные таблицы, инфекционная активность
материала составляла 2,5—3 lg МЛД
5 0
/ мл, при пассировании
изоляты имели невысокие титры, практически не повышающиеся
на II пассаже, за исключением материала R-2, который являлся
более активным и к III пассажу наблюдалось повышение титра
вируса на
1
lg.
166
Научная электронная библиотека ЦНСХБ