158 / 604
Подбор оптимальной дозы вируса ящура
для заражения суспензии клеток ВНК-21
Д.В. Михалишин, Н.К Беляев, Б.Л. Мании
Всероссийский НИИ защиты животных, г. Владимир
Актуальной задачей остается промышленное получение ви
русной биомассы в достаточных количествах для изготовления
противоящурных вакцин. В связи с этим одной из главных про
блем при культивировании вируса ящура в промышленных куль
тиваторах объемом
2 0 0 0
л является подбор оптимальной дозы
посевного вируса для заражения суспензии клеток ВНК-21.
При выращивании клеток используют разные среды (содер
жащие гидролизаты белков крови, лактальбумина, кормовых
дрожжей и др.) с содержанием сыворотки от 3 до 7,5%, что обу
словливает разные ростовые свойства среды. Все это вызывает
определенные трудности при выборе дозы заражения вирусом
ящура клеток ВНК-21.
Согласно регламенту полуфабрикаты с суспензией клеток
заражают вирусом ящура в дозе 0,2-1,5 ТЦДзо/кл при репро
дукции вируса 10-24 часа. В таком диапазоне невозможно по
добрать оптимальную дозу заражения вирусом ящура для каждо
го полуфабриката, поэтому критерием оценки вирусного сырья
являлось получение с
1
0 0 0
0 0 0
кл/мл -
1
\Гкг/мл вирусспеци-
фического белка (ВСБ) с 85-90% содержанием 146+75S компо
нентов.
Анализ более 200 полуфабрикатов вируса ящура объемом от
1000 -1800 л показал, что лучший выход вируса при 90-95%-
ном поражении клеток получался через 11-14 часов культиви
рования. Руководствуясь этими данными, были проведены иссле
дования по подбору оптимальной дозы вируса ящура для зара
жения суспензии клеток ВНК-21 в реакторах объемом 2000 л в
данной работе. После принятия клеток в реакторы из каждого
культиватора отбирали пробы суспензии клеток ВНК-21 и прово
дили смену ростовой среды на поддерживающую. Вирус ящура
культивировали в сосудах емкостью 2-3 л на роллерной уста
новке при 37° С.
Для культивирования брали суспензию клеток ВНК-21 с
концентрацией 2 500 000-3 000 000 кл/мл, вирус ящура Oj№194,
У Д К 619:616.98:578.835.2:57.082.26
154
Научная электронная библиотека ЦНСХБ