ЭлБиб

Разработка метода ПЦР

для выявления коронавируса КРС

В.А. Кудрявцев, Г.К Доропеикова, А.И. Ломакин,

Л.Б. Прохватилова, П.К. Аянют

АЛ. Гусев

Всероссийский НИИ защиты животных, г. Владимир

Коронавирус крупного рогатого скота (КВ КРС) является

возбудителем диареи новорожденных телят. Вызываемый им эн

терит сопровождается воспалением слизистых оболочек тонкого

и начальной части толстого кишечника, диареей и дегидратаци

ей. Среди телят заболеваемость может достигать 100%, смерт

ность иногда превышает 50% (Исаева, 1992). Вспышки корона-

вирусной диареи телят могут наблюдаться в одних и тех же хо

зяйствах на протяжении нескольких лет (Pensaert and Callebaut,

1978),что, вероятно, связано с присутствием животных-вирусо-

носителей. КВ КРС нередко выделяют из фекалий клинически

здоровых коров, несмотря на присутствие в сыворотке крови ви-

русспецифических антител (Crouch and Acres, 1984; Crouch et

al., 1985). Вирус передается как оральным, так и респираторным

путем. Заболевание распространено повсеместно и наносит зна

чительный экономический ущерб (Mebus

al., 1972; Tsunemitsu

et al., 1991).

Традиционные методы выявления KB КРС (ЭМ, ИФ, ГАд и

РГА) обладают достаточной чувствительностью. Кроме того,

проведение тестов основанных на гемагглютинации затруднено

тем, что образцы фекалий, используемые для диагностики этого

заболевания, содержат неспецифические гемагглютинирующие

агенты (Clark, 1993). Применение такого высокочувствительного

и специфичного метода диагностики, как ИФА, позволяет выя

вить вируспецифические антитела, однако их присутствие не

всегда говорит о наличии патогена.

Наиболее перспективным методом, позволяющим преодо

леть перечисленные выше затруднения, является метод полиме

разной цепной реакции (ПЦР), который отличается высокой чув

ствительностью, специфичностью и быстротой постановки. Спо

собность выявлять частично деградировавшие молекулы вирусных

нуклеиновых кислот позволяет использовать этот метод для ана

лиза даже плохо сохранившегося патогенного материала.

Данное исследование посвящено разработке метода выявле

ния коронавируса КРС непосредственно в патматериале от боль

ных и павших животных с помощью ПЦР.

В качестве мишени для проведения ПЦР был выбран ген

У Д К 619:616.98:578.834.1:636.22/28:616 - 078

133

Научная электронная библиотека ЦНСХБ