комбинированном препарате по сравнению с антигенной актив
ностью моновалентной реовирусной вакцины был выше.
Таким образом, результаты исследований свидетельствуют о
том, что совместная вакцинация против болезни Марека и рео-
вирусного теносиновита живыми вакцинами не препятствует раз
витию иммунитета ни к болезни Марека, ни к реовирусу, поэто
му одновременное введение двух вакцин вполне оправданно.
УДК 619:616.98:578.823.2:636.52/.58
Получение антигена реовирусной инфекции птиц
для постановки непрямого варианта ИФА
А.И. Куприянов, Д.Б. Андрейчук
,
Г.М. Фалина
,
Н.С. Мудрак,
С.К Старов, В.В. Дрыгин
Всероссийский научно-исследовательский институтзащиты животных, г. Владимир
Для ретроспективной диагностики реовирусной инфекции
птиц применяют реакцию нейтрализации, реакцию диффузной пре
ципитации и иммуноферментный анализ. Достоинствами ИФА
являются высокая чувствительность и специфичность, которые
достигаются путем высокой степени очистки и концентрирова
ния антигена, используемого в постановке реакции. Целью наше
го исследования являлось получение концентрированного и высо
коспецифичного препарата реовируса птиц, пригодного для создания
диагностического набора на основе непрямого варианта ИФА.
Вирусный материал получали путем культивирования вак
цинного штамма 1133 на культуре клеток куриных фибробла
стов. Заражение культуры клеток проводили на 3-й день форми
рования монослоя при множественности 0,1-1,0 ТЦД
5 0
/КЛ. В
качестве вирусного материала использовали культуральную сус
пензию после 2-3-дневного накопления, содержащей 10
7*5
ТЦД
5 0
/
мл вируса. С целью извлечения вируса из фрагментов
лизированных клеток клеточный дебрис замораживали на стен
ках роллерных сосудов при -70°С. Для последующей работы ис
пользовали культуральную суспензию и размороженный до 4°С
клеточный дебрис.
Предварительную очистку и концентрирование проводили
ПЭГом (М8000) с 0,15М NaCl. Осадок собирали центрифугиро
ванием и ресуспендировали в STE-буфере. Последующую экс
тракцию вирусного материала проводили двумя способами: с
131
Научная электронная библиотека ЦНСХБ