ЭлБиб

Т Р А Н С Ф О Р М А Ц И Я Л Ь Н А -Д О Л Г У Н Ц А С П О М О Щ Ь Ю A G R O B A C T E R IUM

T U M E F A C IE N S НА П Р И М Е Р Е В В Е Д ЕН И Я Г Е Н А N PT -II

Ч икри зова О .Ф .,

П оляков А .В .

В сероссийский н аучн о-и сследовательски й институ т л ь н а, Т орж ок, Т верской обл.

Г ен но-ин ж енер н ы с исследования н а л ь н е-м асличном ш и роко п р о во дятся в

К а н а д е (Jo rd o n М .С ., M cH u g h en А ., 1987; 1988; M cH u g h en А ., 1989), В еликобри-

тан и и (B asiran N . e t a ll., 1987) и Ч ехии (M lyn aro v a L., P re to v a A .,1993). О днако

д л я тр ан сф о р м ац и и л ь н а-д о л гу н ца треб ую тся специф ичны е условия, о б у сл о в-

л ен н ы е его пониж енной м орф огенетической акти вн о стью in v itro .

Г и п о к о ти л ьи ы с сегм енты л ьн а-д о л гу нц а со р то в Д аш ко в ски й 2 и Б ели нк а ко-

ку л ь т и ви р о вал и совм естн о с A . tu m efaciens ш там м ов L B A 4404 ( P B I 121) и А 281

(pT iB o 342) p G A 482. П ри это м и спользовали ги п окоти льн ы е сегменты , дли н ой

1-3 мм (B asiran N ., 1987; D ra p p e r J., 1988; M ly n a ro v a L., P re to v a A .,1993), а так

ж е с ч а сти ч н о (до 50 % ) удаленны м эпидерм исом дли н ой 8-10 мм (M cH ughen

A ., 1989;D ong J.Z ., M c H ug en А ., 1991) и сегм енты ан ал о ги ч н о й дли н ы , п р о ко л о

ты е п о всей п о верхн ости иглой.

В зависи м о сти о т р азм ер а и во зр аста гипо коти льп ы х сегм ентов, число м ор-

ф о ген н ы х экспл а н т о в в ар ьи р о вал о о т 12% д о 54 %. Н аи больш ей реген ерац и он

ной сп о соб н о стью о б л ад а л и 7-8 суточн ы е эксп л ан ты л ьн а-д о л гу н ц а с части чн о

у д ал ен н ы м эп и дерм и сом . М ор ф о ген н ы е эксп л ан ты составили в ко н тр о л е 71 % .

С о с тав п и тател ьн о й среды такж е о казы вал сущ ественное влияние на п роцесс

р еген ер ац и и . И н дукц и я тран сф о р м и р о ван н ы х по чек и п о бего в н а среде M SB 5 2'

б ы л а в среднем в 1,7 р а з выш е, чем н а среде M S.

П р и изучении д ей стви я ан ти би о ти ко в н а м орф оген ети ческую акти вн ость

б ы л о у стан о вл ен о , ч то о тб о р п р едп олож и тельн о тран сф о р м и р о ван н ы х эксп

л а н т о в л ь н а-д о л гу и ц а д о ст ато ч н о эф ф екти вн о п р оходи л н а п и тательн ы х сре

д а х , со дер ж ащ и х 50-100 м г/л к а нам и ц ин а, 200 м г/л к арбени ц и л л и на и 200 м г/л

к л а ф о р а н а .

Н а о сн о ве у соверш ен ствован н ой м етодики бы ли получены ж изнеспособ

ны е р а с т ени я - р е г енер ан ты , тран сген н ая п р и р о д а ко то р ы х п одтвер ж д ен а н ал и

чием акти вн о сти ф ер м ен та N F T -II (неом и ци н ф о сф о тр ан сф ер азы II).

Научная электронная библиотека ЦНСХБ