ЭлБиб

ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ТРАНСФОРМАЦИЯ РАСТЕНИЙ, СОМАТИЧЕСКАЯ ГИБРИДИЗАЦИЯ

ПОЛУЧЕНИЕТРАНСГЕННЫХРАСТЕНИЙЯРОВОГОРАПСА

(

BRASSICA NAPUSL.)

КалпеКоссно1Е.&Шаденнов2А.А, Ивашута1С.И.

1Институт кормов им. В.Р.Вильямса РАСХН, Москва, Россия.

1Институт сельскохозяйственной биотехнологии РАСХН, Москва, Россия.

Современные сорта рапса отличаются узким генетическим

потенциалом, т.к. они созданы на основе безэрукового сорта Ого

(Канада) и низкоглюкозинолатного сорта Bronowski (Польша). Введение

новых генов методами генетической инженерии - один из возможных

путей обогащения генофонда. В качестве исходного материала взяты

шесть современных сортов ярового рапса. Процедура трансформации

проходила согласно протоколу разработанному M o loney с соавт. (

Moloney еt аl ., 1989). Частота регенерации из гипокотилей колебалась

в пределах от 0 до 56% из семядолей - от II до 61%. Каждый

регенерировавший эксплант давал от одного до пяти побегов. Для

переноса в растительные клетки генов устойчивости к биотическим

стрессам использовали плазмиду рН22Кпео с геном дефензина

амаранта (ас), введеную в штамм С58С1 (pGV3850)

Agrobacterium

tumifasiens.

Первые растения- регенеранты появлялись на 14 сутки после

инокуляции эксплантов. Устойчивые к Km растения были отобраны во

всех вариантах опыта, где в качестве эксплантов использовались

семядоли. Эффективность трансформации составила от 0,9 до 7%.

Зеленые растения - регенеранты из гипокотилей удалось получить только

после предварительной культивации эксплантов на питательной среде.

Эффективность трансформации в этом случае не превышала 3%. Самая

высокая (д о 7%) частота появления устойчивых к Km растений была у

сорта Ратник. Из отобранных на селективной среде 25 растений npt+

активность зафиксирована у двух образцов ( сорта Мадригал и

Ар гум ент). Аналогичный выход устойчивы х к Km растений не

проявляющих активность неомицин-фосфотрансферазы отмечен Fry (Fry

еt а l ., 1987), который объяснял это явление эндогенной устойчивостью

некоторых сортов рапса к аминогликозидам.

2 7 2

Научная электронная библиотека ЦНСХБ