ЭлБиб

Т О Т И П О Т Е Н Т Н О С Т Ь И М О РФ О Г Е Н Е З Р А С ТИ Т Е Л Ь НЫ Х К Л Е Т О К

IN V ITR O

ВЛИЯНИЕ ИСТОЧНИКОВ АЗОТА И ФОСФОРА НАРОСТ И

МОРФОТИП ЭМБРИОГЕННОГО КАЛЛУСА СОРГО

ЭльконинЛ.А., ПахомоваН.В.

Поволжский НИИживотноводства и биотехнологии, 410020 Саратов

В эм б р и о ге н ны х ку л ь тур а х м н о ги х видов зла ко в м о гут

присутствовать два различных морфотипа эмбриогенного каллуса (ЭК):

компактный ЭК (тип I) и рыхлый ЭК (тип II). Менее дифференцированный,

обладающий более высокой скоростью роста рыхлый ЭК имеет большее

значение для экспериментов по генной и клеточной инженерии и

мутационной селекции. Однако формирование рыхлого ЭК наблюдается

лишь у ограниченного числа генотипов; факторы, контролирующие

данный процесс, не изучены.

С целью оптимизации условий для соматического эмбриогенеза и

роста рыхлого ЭК сорго культивировали фрагменты молодых метелок и

незрелы е зародыш и на модиф ицированны х среда х MS и N6,

дополненных аспарагином (1 г/л) и пролином (2 г/л) и содержащих

различные концентрации ионов N03- и/или NH4+ или Р043- Впервые

показано, что ионы фосфора являются индуктором соматического

эмбриогенеза в культуре тканей высших растений. На средах MS и N6

с по выш енной концентрацией ионов Р 0 4 3 - (до 8 .8 -14 .2 mM)

наблю далось 3 -4 -кратное увеличение частоты формирования

эмбриогенных культур из незрелых зародышей и 1.5-2-кратное

у в е л и ч е н и е м ассы ЭК. П овыш ение со держ ания и сточни ков

неорганического азота - ионов NH4+ и N 03 - в среде, дополненной

аминокислотами, значительно усиливает индукцию и рост эмбриогенного

каллуса. Среда М2, содержащая 62.5 mM NH4+ и 72.4 mM N03-,

оказалась благоприятной для разных генотипов, превосходя при этом

разработанные ранее среды для получения морфогенных каллусных

культур сорго. Выявлено, что концентрация ионов N03- и соотношение

N03 -/NH4+ являются критическими факторами для формирования

рыхлого эмбриогенного каллуса сорго. Высокий уровень NH4+ (20.6

mM) при сравнительно низкой концентрации N 03 - (39.9 mM) ведет к

формированию компактного ЭК. Высокий уровень N03- (79.5-82.4 mM)

или высокое соотношение N03-/NH4+ - (4:1) при низком уровне N03-

(28.0 mM) вызывают формирование рыхлого ЭК. Разные образцы сорго

проявляют разную потребность в уровне N03-, необходимом для роста

рыхлого эмбриогенного каллуса.

187

Научная электронная библиотека ЦНСХБ