Ñàäîâîäñòâî è âèíîãðàäàðñòâî, ¹ 4, 2015
25
БИОТЕХНОЛОГИЯ
П
ри решении задач надежного получе-
ния плодовых, ягодных и декоративных
культур из единичных клеток методы клеточной
селекции позволяют проводить отбор в контро-
лируемых селективных условиях. Особенно
интересным аспектом применения биотехноло-
гических методов является возможность индук-
ции генетических изменений для придания рас-
тительным организмам необходимых признаков.
В настоящее время наиболее эффективными
методами индукции изменений считаются сле-
дующие [1]:
1) регенерация из комплексных эксплантов
для получения сомаклональных и гаметокло-
нальных вариантов;
2) мутагенез
in vitro
с последующей регене-
рацией растений;
3) получение растений с измененной плоид-
ностью;
4) различные операции с протопластами;
5) генетическая трансформация, в том числе
с использованием бактериальных векторов.
Практически все перечисленные позиции мо-
гут быть осуществлены только при наличии на-
дежных способов регенерации растений из тех
или иных типов эксплантов. Для большинства
плодовых и ягодных культур наиболее перспек-
тивными, по-видимому, являются направления
регенерации растений из комплексных эксплан-
тов типа листовых дисков, каллусной ткани и
пыльников, отработанные для некоторых видов
растений. Использование таких структур пер-
спективно также для отбора сомаклональных
вариантов, как это было продемонстрировано на
примере получения сомаклонов яблони, облада-
ющей повышенной устойчивостью к возбудите-
лю бактериального ожога (
Erwinia amylovora
)
[2] и различной способностью к пролиферации
in vitro
и ризогенезу [3].
Культура пыльников позволяет гораздо бы-
стрее создать гомозиготные диплоидные линии по
сравнению с традиционными методами селекции.
Гаплоидное состояние дает возможность обна-
ружить рецессивные мутации сразу же после
воздействия мутагенами, а в случае появления
гаметоклональных вариантов отобрать формы с
полезными признаками.
Имеются сведения о культивировании пыль-
ников ежевики, малины и их гибридов, вишни,
черемухи, вишне-черемуховых и вишне-че-
решневых гибридов [4, 5]. Однако информа-
ция о получении регенерантов-гаплоидов этих
культур пока отсутствует.
Несмотря на довольно большое число работ
по культуре пыльников плодовых растений,
еще не удалось создать надежную методику по-
лучения гаплоидов
in vitro
. Исследователи в ос-
новном изучали влияние гормонального и ми-
нерального составов питательных сред, фазы
развития пыльцы, методы стерилизации бу-
тонов, физические факторы культивирования.
Практически не изучены потребности культи-
вируемых пыльников в сахарах, не определены
их требования к уровню осмотического давле-
ния в зависимости от целей культивирования.
Для систем генетической трансформа-
ции с использованием в качестве вектора
Agrobacterium
большой интерес представляет
культура листовых дисков садовых растений.
Положительные результаты в получении реге-
нерантов из листовых дисков рода
Rubus
были
достигнуты, в частности, в работах сотруд-
ников нашего института [6]. Авторы изуча-
ли особенности регенерации целых растений
ежевики
(Rubus
sp.), малины черной
(Rubus
occidentalis
L.)
и красной
(Rubus idaeus
L.) из
листовых дисков, листьев, черешков и отрез-
ков междоузлий
in vitro.
Было установлено,
что наиболее высокой способностью к регене-
рации побегов обладали отрезки междоузлий,
наиболее низкой – листовые диски. Эксплан-
ты ежевики сорта Торнфри, малины черной и
красной образовали большее число регенера-
тов при культивировании на среде со смесью
level illumination provided increasing of rate regeneration. The same effect could be obtained by means
of wounding of leaf blade. In general the rate of regeneration depended on species and varieties pe-
culiarities, nutrient media composition, cultivation conditions. The worked out techniques can be used
for genetic engineering and virology investigation, somaclonal selection, plant propagation including
“artificial seeds” creation.
Key words:
raspberry, blackberry, regeneration, leaf discs, anther culture.
Электронная Науч ая СельскоХозяйственная Библиотека