ЭлБиб

пероксидазу выделяли 2 M l NaCI в 0,01 М ФБ (апопластная

фракция). Опыты проводили в 3-х биологических повторностях,

по 5 каллусов в каждый срок.

На начальном этапе совместного культивирования (3 сут)

обнаружена обратно пропорциональня зависимость уровня

анионной пероксидазы в цитоплазматической фракции фермента

от концентрации ХОС в среде. Так максимальное количество

белка (250±14 мкг/г сырого веса) синтезировалось на среде МС с

добавлением ХОС 0,01 мг/л. По мере возрастания концентрации

ХОС

(от

до

100

мг/л) уровень

изофермента

цитоплазматической фракции каллусов снижался соответственно

до 165±11 и 48 ,1±2,4 мкг/г сырого веса. Интересно, что низкие

концентрации ХОС в начале опыта не оказывали заметного

влияния на содержание анионной пероксидазы в апопласте

(62,6±3,7 мкг/г - контроль; 69,5±4,1 мкг/г - ХОС 1 мг/л). В то же

время, в дальнейшем (6-10 сут) под их влиянием происходило

значительное увеличение уровня изофермента во внеклеточной

фракции (при ХОС 1мг/л - до 202±14). Высокая концентрация

ХОС (100 мг/л) подавляла секрецию анионной пероксидазы в

апопласт. Обращает на себя внимание тот факт, что низкие

концентрации ХОС (0,01 и 1 мг/л) стимулировали как синтез

анионной пероксидазы в цитоплазматической фракции, так и

выход ее во внеклеточное пространство. При этом ХОС в

концентрации 1 мг/л больше влияли на накопление изофермента

на начальном этапе совместного культивирования, а ХОС в

концентрации 0,01 мг/л вызывали более медленное, но при этом и

более значительное увеличение уровня анионной пероксидазы в

апопласте к 10 сут опыта.

Таким образом, разработка и применение метода ИФА

позволили нам установить, что ХОС в концентрации 0,01 и 1 мг/л

повышают уровень анионной пероксидазы в цитоплазматической

фракции белка в начале совместного культивирования каллусов

пшеницы с возбудителем твердой головни, а в дальнейшем

способствуют выделению ее в апопласт, где изофермент напрямую

может участвовать в защитных реакциях в непосредственной

близости от грибного патогена.

Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ-Лгидель

№05-04-97913.

430

Научная электронная библиотека ЦНСХБ