3.
Получить жизнеспособные эмбрионы птиц из благополучной по
инфекционным болезням птицефабрики.
Подготовка материала для экспериментов и эксперименты на куриных
эмбрионах должны выполняться с соблюдением оптимальных условий и
стерильности.
Для оценки результатов использовали методы: световой микроскопии -
и ссл ед о ван и е нативных препаратов из п ораж енны х участков
хорионаллантоисных оболочек; гистологические срезы, а также электронно
микроскопические исследования зараж енных эмбрионов методом
электронной микроскопии (сканированием и глубинным просвечиванием
опытного материала).
При наблюдении за эмбрионами учитывали подвижность зародышей
или их гибель, которую считали специфической через сутки, следующие
после инокуляции спорозоитов C.parvum в хорионаллантоисную полость и
хорионаллантоисную оболочку (ХАО). Погибшие эмбрионы вскрывали в
день гибели и изучали развивающиеся паразитические организмы.
Первоначально контролировали микроскопически в нативных препаратах
из ХАО и амниотических оболочек (АМО), а также из органов и тканей
зародыша на наличие очагов поражения и развивающихся стадий паразита.
Исследовали также амниотическую жидкость на наличие свободных
паразитических организмов.
В серии проведенных нами экспериментов использовали 8-10-суточных
куриных эмбрионов, а в качестве заражающего материала были спорозоиты
Cryptosporidium parvum («Якутский штамм»), полученные in vitro.
Полный жизненый цикл р азви тия парази та у стан овл ен
преимущественно на хорионаллантоисных и амниотических оболочках ку
риных эмбрионов (трофозоиты —меронты, гамонты - зигота - ооциста)
после инокуляции спорозоитов, полученных in vitro. Развитие паразита про
исходило в цитоплазме клетки хозяина.
Таким образом, нами впервые показана возможность развития в эмбрионах
птиц С. parvum, полученных от спонтанно больных криптоспоридиозом жи
вотных в зоне Крайнего Севера (Якутии). Впервые заражающим началом ис
пользованы спорозоиты С. parvum, полученные in vitro.
На основании экспериментов на куриных эмбрионах можно утверждать,
что получена лабораторная биологическая модель - куриный эмбрион,
которая позволяет продолжить изучение криптоспоридий на светоптичес-
ком, электронно-микроскопическом и молекулярном уровнях. Имеется воз
можность использования удобной и экономически выгодной модели для
экспресс-оценки эффективности фармакологических и биологических
средств с целью изыскания эффективных антикриптоспоридийных
препаратов, а это, в свою очередь, открывает возможность для решения
основной проблемы криптоспоридиоза млекопитающих - лечения и
профилактики.
384
Научная электронная библиотека ЦНСХБ