ЭлБиб

этого растительный материал отмывали в мыльном растворе в те

чение 20 мин и споласкивали в проточной воде. Далее все манипу

ляции проводили в стерильных условиях ламинар-бокса. В качест

ве стерилизующих растворов использовали 3 %- ный раствор пере

киси водорода, 70 %-ный этанол и 0.1 %-ный раствор диацида.

Объекты стерилизовали путем погружения на время от 1 до 25 мин

в перечисленные выше растворы с последующим трехкратным

промыванием в стерильной дистиллированной воде в течение 45

мин. Использование нескольких стерилизующих веществ, в раз

личных концентрациях и комбинациях позволило найти оптималь

ные условия стерилизации эксплантов. Эксперименты показали,

что изолированным почкам возобновления пиона уклоняющегося

свойственна высокая степень инфицированное™. Нами разработан

эффективный прием стерилизации пазушных почек Р.

anomala,

позволяющий получить достаточно высокий процент жизнеспо

собных эксплантов.

Простерилизованные почки возобновления помещали в сте

рильную чашку Петри. Далее эксплантировали боковые почки из

пазух покровных чешуи почки возобновления. Вычленяли боковые

почки, удаляя покровные чешуи с почки возобновления, последова

тельно обнажая бутон с зачаточными листьями. Эту операцию про

водили с помощью глазного ланцета и препаровальной иглы под

стереоскопическим микроскопом МБС-10, установленным в пыле

защитной камере (ламинар-боксе). Изолированные боковые почки

специальной препаровальной иглой немедленно помещали на по

верхность агаризованной среды по прописи Мурасиге и Скуга в про

бирках, чтобы избежать подсыхания. Пробирки в свою очередь были

размещены в культуральной комнате с соответствующими условия

ми: освещенность 3 тыс. люкс, температура 26°С, относительная

влажность воздуха 70 %.

Боковые резервные почки, располагающиеся в пазухах 9-11

покровных чешуи, наиболее крупные и дифференцированные, ха

рактеризовались высокой морфогенетической потенцией. Подбор

соотношения гормонов в питательной среде позволил увеличить

пролиферационную способность боковых почек. Гибберелловая

кислота оказывала на экспланты пиона уклоняющегося стимули

рующее действие на рост. Использование её в концентрации 1.0

мг/л было эффективным при совместном применении с БАП и

206

Научная электрон ая библ отека ЦНСХБ