ЭлБиб

Агротехнологии

Коллекционные штаммы спорыньи ВИЛАР, химическая классификация,

селекция и воспроизводство.

Комарова

Е .Л .

ВИЛАР, Москва, Россия.

Селекционные работы по спорынье относились к одному из профилирующих направлений ВИЛАР, которое

поддерживается уже более 50 лет. В его истоках стояли такие специалисты института, как Масапаб И.А., Заболот

ная В.С., Островский Н.И., Баньковская А.Н. и др. [1 -4]. Главной проблемой этой тематики в то время было созда

ние растительной базы и обеспечение отечественным сырьем спорыньи фармацевтическую промышленность,

что являлось первым звеном основной задачи института по созданию замкнутого цикла производства — от полу

чения сырья до выпуска лекарственного препарата.

Был проведен большой объем работ, связанный с селекцией штаммов спорыньи -продуцентов эргопептидов,

начиная от изучения дикорастущих склероциев и сбора растительного материала до получения высокопродуктив

ных, селективных штаммов спорыньи, которые были введены в культуру по разработанным технологиям возделы

вания и обеспечили сырьевую базу страны [5-14]. До настоящего времени, это направление исследовательских

работ успешно поддерживалось в отделе биотехнологии ВИЛАР под руководством д.б.н. Шаина С.С. [5].

К 1990 году в ВИЛАР сложилась основная коллекция селекционных штаммов спорыньи продуцирующей эрго

пептиды, которая представлена четырьмя типами штаммов с генетически закрепленной функцией продуцирова

ния целевых эргоалкалоидов. Внутри каждого типа штамма имеется несколько линий, которые различаются по

своим биологическим показателям: урожайности, продуктивности, устойчивости к климатическим условиям, аль-

би-носные линии и др. Классификация линий спорыньи внутри штамма возможна при использовании каких-либо

биологических тестов и изучении генетических различий.

Первый из коллекционных типов штаммов представлен продуцентом алкалоидов спорыньи эрготаминовой

группы: I — Эрготаминовый штамм спорыньи — продуцент эрготамина (3) (рис.1).

Основная часть коллекционных

штаммов спорыньи ВИЛАР пред

ставлена продуцентами алкалои

дов эрготоксиновой группы: II —

Эргокристиновый штамм — проду

цент эргокристина(7); III — Эрго-

токсиновый штамм — продуцент

эргокорнина(б), а-эргокриптина

(6) и р-эргокриптина (7) и IV— Эр-

гокриптиновый штамм — проду

цент а-эргокриптина(б) и р-эрго-

криптина(8).

Помимо целевых эргоапкалои-

дов в представленных штаммах

присутствуют сопутствующие ал

калоиды, такие как эргометрин (1),

валинамид (2), эрготамин (3),

С8(8)-эпимеры как целевых, так и

сопутствующих эргоалкалоидов

(содержание каждой из сопутству

ющих примесей в отдельных лини

ях штаммов и индивидуальных

склероциях может колебаться от

1% до 15%. Также присутствуют

минорные примеси, содержание

каждой из которых обычно состав

ляет от менее 1% до 5% — это по

лупродукты биосинтеза эргоалка

лоидов, или их деструкции, изоме

ризации и т.д., наличие которых в

штамме не является стабильным.

(рис.1).

Для характеристики коллекции

и быстрой систематизации скле

роциев спорыньи в процессе се

лекционных работ нами использу

ется химический метод — хрома

тографическая характеристика с

использованием метода хромато-

флюориметрии [б]. Это метод ТСХ

с применением отработанных хро

матографических параметров, и

последующей оценкой хрома-то-

грамм по флуоресценции пятен эр-

гоапкалоидов в УФ-свете в сравне

нии со свидетелями, для чего ис

Рис. 1. Схема хроматограмм (пластинки Силуфол (Чехия) 20x20, система раствори

телей: дихлорметан-диоксан-спирт этиловый 96%-аммиак концентрированный в соотноше

нии 36:4:2:0,2, визуальная оценка пятен эргоалкалоидов по флуоресценции в УФ-свете при

360 нм), где:

I - Эрготаминовый штамм, П - Эргокристиновый штамм, Ш - Эрготоксиновый

штамм, IV - Эргокриптияовый штамм, V - Эргокорнамовый штамм спорыньи.

Расположение индивидуальных эргоалкалоидов соответствует: 1- эргометрин; 2 -

валинамид; 3 - эрготамин; 4 - эргокорнам; 5 - эргокорнин; 6 - а-эргокриптин; 7 -э р -

гокристин; 8 - Р-эргокриптнн; 9 - эрготаминин; 10 - эргокорнинин; 11 - а-

эргокриптинин; 12 - р-эргокрнптинин; 13 - эргокристинин.

353

Научная электронная библиотека ЦНСХБ