ЭлБиб

В самом начале 1992 года в ходе работ по выделению

мРНК из проростков пшеницы сорта Краснодарская 39 с

помощью двуциклической аффинной хроматографии на

колонке поли-У-сефарозы нами были выявлены законо

мерные изменения выхода мРНК второго цикла очистки

в процентном отношении к мРНК первого цикла, т.е. %

поли-А++ от поли-А+ (индекс стабильности мРНК). Изме

нения определялись условиями роста растения (темпера

тура, свет и др.) (9,10). Этот факт привлек наше внимание

и послужил отправной точкой к созданию простейшей

системы для изучения дифференциальной стабильности

мРНК, которая получила название ommp от латинского

выражения «omnia mea mecum porto» — «все свое несу с

собой» (11-16).

В ближайшее время нами было показано, что индекс

стабильности мРНК прямо пропорционален интенсивнос

ти роста растений и является сортоспецифической вели

чиной, хорошо отражающей генетические особенности и

физиологическое состояние растения. На ряде сортов

пшеницы и ячменя показана перспективность оценки по

индексу стабильности суммарной поли-А-содержащей

мРНК холодостойкости и фотопериодизма растений (9,10).

На примере ряда индивидуальных мРНК методом мо

лекулярной гибридизации с радиоактивно меченными ген-

специфическими олигонуклеотидами доказано, что при

инкубации препарата высокоочищенной, высокополимер

ной РНК (in vitro) происходит Mg-зависимый дифферен

циальный распад мРНК по тем же закономерностям, что

имеют место в живой растительной клетке (in vivo) при

блокаде транскрипции генов актиномицином Д (11-15).

Анализ научной литературы показал, что наибольшее

значение в жизни растений играют такие регуляторные

белки, как субъединица альфа фактора элонгации транс

ляции 1 и фитохром А. Изучение модуляции стабильности

соответствующих им мРНК под влиянием холода (4° С) и

света выявил большие возможности в повышении точно

сти и разрешающей способности методов оценки стрес-

соустойчивости и фотопериодизма сортов пшеницы и яч

меня (2,15).

Методом обратной транскрипции с последующей по

лимеразной цепной реакцией в течение трех лет (1998-

2000

) были проведены масштабные исследования модуля

ции стабильности мРНК запасных белков - зеинов в ходе

618

Научная электронная библиотека ЦНСХБ