ЭлБиб

к липополисахаридному и Н-антигенам получали на свободных

от специфического патогена поросятах в возрасте 80-100 дней.

Было установлено, что оптимальной сенсибилизирующей

концентрацией антигенов является 1-5 мкг/мл (по белку), а

используемое рабочее разведение испытуемой сыворотки 1:400

при инструментальном учете результатов реакции. В качестве

детекторных антител были использованы антивидовые иммуно-

ферментные. конъюгаты, выпускаемые в НИИ эпидемиологии и

микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи.

При постановке реакции в одном разведении исследуемые

пробы сыворотки (более 300 проб), отрицательные и положи

тельные контрольные пробы сыворотки тестировали в разведе

нии 1:400 в двух повторностях. Учет результатов реакции прово

дили спектрофотометрически при длине волны 492 нм. Наличие

или отсутствие антител определяли путем вычисления отноше

ния (ИС/ПК): средней оптической плотности испытуемой сыво

ротки (ИС) к среднему значению оптической плотности стан

дартного положительного контроля (ПК). Было определено, что

различия между средними значениями положительной и отрица

тельной контрольных сывороток (ПКх-ОКх) должно быть более

0,5. Значение оптической плотности для отрицательной кон

трольной сыворотки должно быть менее или равно 0,20. Показа

но, что если ИС/ПК - отношение меньше 0,20, то проба сыво

ротки крови считается отрицательной, если ИС/ПК - отноше

ние равно 0,21 - 0,29, то проба считается сомнительной, а если

ИС/ПК - отношение равно или больше 0,30, то проба считается

положительной.

Для сравнения показателей при визуальном и инструмен

тальном учете удобнее последние привести к одинаковой едини

це измерения - степени разведения испытуемой сыворотки. Это

можно сделать при помощи формулы:

LgTHTP = l,40(Lg ИС/ПК)+3,51,

где: ИС - значение оптической плотности исследуемой пробы

сыворотки, ПК - значение оптической плотности положительно

го контроля, 1,40 и 3,51 - постоянные коэффициенты.

Антилогарифм полученной величины соответствует расчет

ному титру активности испытуемой сыворотки.

Проведенное сравнение результатов, полученных при расче

те титра по одному разведению с использованием полученной

формулы и при раститровке сывороток, оказалось сопоставимым

и показало ошибку в пределах одного разведения. Результаты

представлены в таблице.

316

Научн я электронная библи тека ЦНСХБ