ЭлБиб

Получение специфической сыворотки к вирусу чумы

мелких жвачных на кроликах

А.В. Степанов, М.Б. Новикова.

И.Ф. Вишняков

]

ЕЛ. Анохина

Всероссийский НИИ ветеринарной вирусологии и микробиологии г. Покров

Чума мелких жвачных (ЧМЖ) - особо опасная вирусная ин

фекция домашних и диких мелких жвачных, широко распростра

ненная на Африканском континенте и в Азии. Заболевание вы

зывает значительные экономические потери на эндемичных тер

риториях и имеет тенденцию к дальнейшему распространению,

что требует разработки средств и методов лабораторной диагно

стики. Одним из основных компонентов, используемых в тради

ционных методах диагностики вирусных инфекций, являются спе

цифические антитела.

Целью нашей работы являлось получение высокоактивной

специфической сыворотки к вирусу ЧМЖ и выделение из нее

иммуноглобулинов, пригодных для использования в лаборатор

ной диагностике заболевания.

В качестве доноров сыворотки использовали кроликов мас

сой 2-2,5 кг. Иммунизацию проводили очищенным концентриро

ванным вирусом ЧМЖ. Для его получения выращенный в пере

виваемой культуре клеток почки африканской зеленой мартышки

(линия Vero) вирус с инфекционной активностью не ниже

4 ,5

ТЦД50/ см3 осветляли центрифугированием при 10000 g 30 ми

нут. Концентрирование вируса проводили из надосадочной жид

кости преципитацией полиэтиленгликолем с молекулярной мас

сой 6000 (7% масса/объем) в течение 4 часов при 4°С. Преци

питат осаждали центрифугированием при 4000 g 30 минут и ре-

суспендировали в 1/100 первоначального объема NTE-буфера

(0,01 М трис-НС1, pH 7,4, 0,1 М NaCl, 0,001 М ЭДТА). Полу

ченный концентрат вируса очищали в ступенчатом градиенте

концентрации сахарозы ультрацентрифугированием при 140000 g

в течение 3 часов. Интерфазу отбирали и ресуспендировали в

NTE-буфере с последующим переосаждением ультрацентрифуги

рованием при 140000 g

час. Полученный материал ресуспен-

У Д К 619:616.036.22:578.831.2:636.32/.39

202

Научная электронная библиотека ЦНСХБ