ЭлБиб

196 / 604

вируса чумы свиней проводили в БелНИИЭВ, лаборатории ви­
русных инфекций и лаборатории иммунологии ВНИиТИБП
(г. Щелково, Россия). В качестве антительного компонента на­
бора использовали препараты антител к вирусу чумы свиней,
полученные из сыворотки крови свиней, больных и переболев­
ших чумой, очищенные методом афинной хромотографии на се-
фарозе и концентрированные с помощью мембран УАМ-600. Тит­
ры антител к вирусу чумы в сыворотках крови определяли мето­
дом антительного варианта ИФА, разработанного нами (В.Т. Са­
кович, В.И. Клюкина, 1996). Использовали очищенные и концен­
трированные препараты антител к вирусу чумы с титрами не
ниже 7-8,0 лог2* Нормальная сыворотка здоровых свиней, не
имеющих антител к вирусу чумы, служила контролем.
В качестве антигенного компонента набора диагнотсикума
при постановке ИФА использовали культуральную вируссодер­
жащую жидкость при репродукции вакцинного вируса чумы сви­
ней или штамма Alfort/187 вируса чумы, выращенных на пере­
виваемой культуре клеток РК-15. Полученную жидкость трех­
кратно подвергали термолизису, центрифугировали, надосадоч-
ную жидкость обрабатывали полиэтиленгликолем (ПЭГ-6000) и
ресуспензировали в 1 / 1 0 0 исходного объема.
Активность вируса чумы составила 4,0-4,5 ККИД5 0/СМ3.
Оптимальное разведение пероксидазного конъюгата соста­
вило 1:128. Наработано 0,5 тыс. доз диагностикума ИФА для об­
наружения антигена вируса КЧС. Для испытания специфичности
и активности диагностического набора исследовали в ИФА: 30
проб вакцинного вируса чумы ЛК и 20 проб эпизоотического ви­
руса КЧС (штамм «Отечественный»), выращенных на культуре
клеток РК-15; 10 проб патматериала от павших свиней, больных
чумой; 10 проб вируса ТГС; 10 проб ротавируса, 10 проб энтеро­
вирусов свиней, 20 проб суспензии культуры клеток РК-15, не
инфицированной вирусом чумы.
Для определения достоверности результатов исследования
материалов методом ИФА на чуму названные материалы иссле­
довали в РИФ с использованием культуры клеток РК-15, выра­
щенных на покровных стеклах.
При испытании специфичности и активности диагностиче­
ского набора антиген вируса чумы обнаружен в 50 пробах куль­
туральной жидкости, содержащей вакцинный вирус ЛК и эпизо­
отический штамм «Отечественный» в титре 3,0 и 6,0 Л0 Г2 соот­
ветственно, в 1 0 пробах 2 0 % суспензии из органов (селезенка,
миндалины, лимфоузлы) павших свиней, больных чумой в титрах
3,5-4,0 лоГ2- Антиген вируса чумы не был выявлен в 30 пробах
культуральной жидкости, содержащей вирус болезни Ауески,
192
Научная электронная библиотека ЦНСХБ