гатом «авидин-пероксидаза». Скопления прионного белка окра
шивали З-амино-9-этилкарбазолом, а клеточные структуры - рас
твором гематоксилина по Мейеру. При таком окрашивании ско
пления PrPBSE приобретают темно-красный цвет в результате
образования нерастворимого продукта окисления З-амино-9-этил-
карбазола, которые хорошо видны на фоне клеточных структур,
окрашивающихся гематоксилином в светло-синий цвет.
С целью поиска оптимальной концентрации, пригодной для
обнаружения PrPBSE в BSE-позитивных и определения фона в
BSE-негативных препаратах, были испытаны разведения антисы
вороток от 1:50 до 1:4000.
Проведенные исследования позволили отобрать 12 антисыво
роток, показавших отношение сигнал/фон и уровень окрашивания
скоплений патогенной изоформы прионного белка, достаточный
для его выявления в срезах ткани мозга. Для
8
РгР-специфичных
антисывороток рабочие разведения составляли от 1000 до 4000.
При этом фон с BSE-негативными препаратами мозга КРС наблю
дали в разведениях менее 250. Наиболее активные и специфичные
антисыворотки были получены на пептиды 25-36, 106-134, 186—
202 и 214-240, а также конъюгат (17-36)+КШ.
Таким образом, в результате проведенной работы получены
антисыворотки, которые были использованы для разработки имму-
ногистохимического метода выявления PrPBSE в препаратах мозга
КРС, больного ГЭ.
УДК 619 :616 .98-636 .4-07
Использование ИФАдля постановки диагноза
на классическую чуму свиней
В.Т. Сакович
,
А.С. Ястребов, А.П. Лысенко, В.Л. Кремез,
В.И. Клюкина
Белорусский НИИ экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского, г. Минск;
Республиканская госветлаборатория, г. Минск;
Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт
био
логической промышленности, г. Воронеж
Классическая чума свиней (КЧС) была и остается одной из
самых опасных вирусных болезней животных, наносящей хозяй
ствам большой экономический ущерб. Постановка диагноза на
чуму по клиническим признакам и патологоанатомическим изме
189
Научная электронная библ отека ЦНСХБ