ЭлБиб

13 / 592

similarity of these roots with the roots of juvenile plants. In the case of plants
where roots serve only as a storage organ for secondary products but not
the place of their synthesis, cultured hairy roots could not synthesize these
products as well (Linum usitatissimum. Glycirrhize uraiensis). Hairy roots
culturing with vesicular-arbuscuiar mycorrhtza (VAM) permitted us to observe
all developmental phases of VAM until sporulation under controlled conditions.
This dual culture hairy rootsA/AM provides for the possibility to study the
mechanisms controlling VAM development on cultured roots and, on the
other hand, о in vitro mass-produce of the arbuscular mycorrhizal fungi,
associated with Ri T-DNA transformed roots.
ТРАНСФОРМАЦИЯ ПЛАСТИДВЫСШИХРАСТЕНИЙ:НОВЫЕ
ВОЗМОЖНОСТИДЛЯФУНДАМЕНТАЛЬНОЙ НАУКИ И
ПРИКЛАДНОЙБИОТЕХНОЛОГИИ
М АЛИ ГА ПАЛ
Waksman Institute, Rutgers, the State Uneversity o f New Jersey, Piscotaway, NJ
08854-8010; fax: (132)445-5329; E-Mail:
Показано 500 -10000 копийное (на клетку) присутствие циклических
пластидных геномов размером 120-180 кб. Введение чужеродного гена
в пластидный геном было осуществлено с помощью направленной,
целевой вставки гена. Вставляемый ген клонировался рядом с
выбранным маркерным геном, который фланкировался специальными
последовательностями ("мишень") пластидной ДНК в плазмидном
векторе. За баллистической трансформацией следовала интеграция этих
сцепленных"трансгенов" и элиминация пластидного генома "дикого типа"
во время повторных клеточных делений. Протокол наиболее эффективной
трансформации опирался на отбор химерного aadA гена, кодирующего
устойчивость к спектиномицину [ ref 1.2.].
Трансформация пластид была использована для следующих целей:
чтобы изучить биологию пластид [3], генную регуляцию [4,5] и изменения
РНК [6]. Пластидный геном является очень привлекательным объектом
для конструирования, так как лластидные белки обладают высоким
уровнем экспрессии [7,8]; гены, ответственные за метаболизм могут
кодироваться в полицистронной mРНК; вводимые гены, благодаря
"целевой" вставке в пластидный геном равномерно экспрессируются;
эти "трансгены" не распространяются через пыльцу. Хорошим примером
высокого уровня эскпрессии чужеродного белка является накопление
прототоксина Bacillus thuringiansis до 3-5% до растворимого белка в
листьях табака, в пластидный геном которого встроен ген сrу!А( с) [8].
___________ _____ _____ П Л Е Н А Р Н ЫЕ Д О КЛ АДЫ ________ _______________
13
Научная электронная библиотека ЦНСХБ