ЭлБиб

Можно подсчитать отдельно мезофильные, палисадные, губчатые

и клетки обкладки, либо общее число клеток.

Из одной суспензии отбираются и подсчитываются 20–25 камер,

а затем высчитывают среднее.

Подсчет числа хлоропластов в клетке. Навеску сырых листьев

(около 50 мг) заливают 3–65 мл 5%-ного раствора окиси хрома (CrО

)

в 0,1 н HCl, пробирку нагревают на водяной бане при 50 ºС около

10 мин. Затем содержимое пробирки гомогенизируют стеклянной па-

лочкой со шлифованным концом. Каплю гомогената помещают на

предметное стекло, накрывают покровным и в полученном препарате

подсчитывают хлоропласты в отдельных клетках. Подсчет проводят не

менее чем в 100 клетках, причем разных по величине.

Количество хлоропластов на единицу площади листа. Определя-

ется как произведение числа клеток и количества хлоропластов в клет-

ке. У 75 % видов число пластид не превышает 20 млн/см

. Большое со-

держание пластид в листе характерно для ксерофитов аридных пустынь.

Неблагоприятные факторы, например дефицит воды, вызывая задержку

растяжения клеток, приводят к формированию мелкоклеточных тканей.

Как правило, при этом число пластид в клетке уменьшается в меньшей

степени, чем объем клетки. В результате увеличивается относительный

объем хлоропластов в клетке и значительно возрастает число хлоропла-

стов на 1 см

. Во многих случаях изменение числа хлоропластов на

1 см

является основной причиной изменения интенсивности фотосин-

теза, рассчитываемого на площадь листьев.

Толщина листа и размеры клеток. Измерения проводятся на попе-

речных срезах листьев. Лист закладывают в прорезь пенопласта и с по-

мощью лезвия делают тонкие срезы одним движением через весь пено-

пласт вместе с листом. Срез с помощью препаровальной иглы помеща-

ют на предметное стекло в каплю раствора 0,35 М сорбита в 0,05 М

трис-HCl буфере (рН 7,4). Толщина среза — 30–50 мкм. Измерение

производится с помощью окуляра-микрометра, в котором 0,1 мм =

100 мкм, объектив 20х, повторность измерения — 100.

Измеряется длина (L) и короткая (Д) ось клеток. Объем клеток

рассчитывается двумя способами в зависимости от формы клетки. Если

L/Д меньше, чем 2,6, то объем клетки рассчитывают по формуле объема

эллипсоида: 0,525 × L × Д

. Если L/Д больше, чем 2,6, то объем рассчи-

тывается по формуле объема цилиндра: 0,78× Д

× L × К, где К — ко-

Электронная Научн я СельскоХозяйственная Библиотека