Table of Contents Table of Contents
Previous Page  182 / 384 Next Page
Information
Show Menu
Previous Page 182 / 384 Next Page
Page Background

181

Том XXXX Часть 1

СБОРНИК НАУЧНЫХ РАБОТ

селекционного процесса создания новых сортов и гибридов подсолнечника.

Наиболее перспективным направлением использования биотехнологических

методов в селекции многих сельскохозяйственных растений является полу-

чение гаплоидов в культуре пыльников и микроспор

in vitro

, так как за одно

поколение достигается гомозиготность линий, что позволяет существенно

сократить продолжительность селекционного процесса. Использование га-

плоидов позволяет сократить продолжительность этапов селекционного про-

цесса, увеличить спектр генетического разнообразия и повысить эффектив-

ность отбора. Практическое использование этих методов сдерживается от-

сутствием универсальной и эффективной технологии индукции гаплоидных

растений подсолнечника

in vitro

.

Целью данного исследования являлось изучение влияния маркерных

генов и концентрации сахарозы на эффективность андроклинии в культуре

пыльников подсолнечника

in vitro.

Материал и методика

Объектами исследований служила самофертильная линия ЮВ-28Б и на-

бор из десяти экспериментальных короткостебельных линий подсолнечника

с различными

dw

-генами. Все линии созданы в генофоне линии ЮВ-28Б ме-

тодом беккроссов. Высота растений у короткостебельных линий была сни-

жена

dw

-генами на 35-52 % по сравнению со стандартной линией ЮВ-28Б [1].

В асептических условиях ламинар-бокса вычленяли неокрашенные пыль-

ники, содержащие микроспоры на поздней одноядерной стадии и помещали

на питательную среду. Использовали среду Мурасиге-Скуга с увеличенным

содержанием нитрата калия КNO

3

до 3,1 г/л, гидролизата казеина 400 мг/л

и добавлением регуляторов роста: β-индолил-3-уксусной кислоты (ИУК) 1

мг/л, 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты (2,4 Д) 2 мг/л, 6-бензиламинопу-

рина (БАП) 0,5 мг/л. Для определения оптимального состава питательной

среды для культивирования пыльников добавляли сахарозу в двух концен-

трациях 30 и 60 г/л.

Анализ пыльников проводили на 30 сутки культивирования. Затем пыль-

ники с вновь образованными на них структурами переносили на питательную

среду Мурасиге-Скуга с добавлением 6-бензиламинопурина (БАП) 0,5 мг/л,

сахарозы 30 г/л, гидролизата казеина 500 мг/л, инозита 100 мг/л и агара 8 г/л.

Качество новообразований (каллусов или эмбриоидов) изучали цитологиче-

скими методами.

Результаты

На 30 сутки культивирования на пыльниках наблюдали большое количе-

ство калусса двух типов: в основании (рис. 1а) на раневой поверхности (пред-

положительно соматический) и на боковой поверхности пыльника (рис. 1б),

предположительно андроклинного происхождения.

Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека