181
Том XXXX Часть 1
СБОРНИК НАУЧНЫХ РАБОТ
селекционного процесса создания новых сортов и гибридов подсолнечника.
Наиболее перспективным направлением использования биотехнологических
методов в селекции многих сельскохозяйственных растений является полу-
чение гаплоидов в культуре пыльников и микроспор
in vitro
, так как за одно
поколение достигается гомозиготность линий, что позволяет существенно
сократить продолжительность селекционного процесса. Использование га-
плоидов позволяет сократить продолжительность этапов селекционного про-
цесса, увеличить спектр генетического разнообразия и повысить эффектив-
ность отбора. Практическое использование этих методов сдерживается от-
сутствием универсальной и эффективной технологии индукции гаплоидных
растений подсолнечника
in vitro
.
Целью данного исследования являлось изучение влияния маркерных
генов и концентрации сахарозы на эффективность андроклинии в культуре
пыльников подсолнечника
in vitro.
Материал и методика
Объектами исследований служила самофертильная линия ЮВ-28Б и на-
бор из десяти экспериментальных короткостебельных линий подсолнечника
с различными
dw
-генами. Все линии созданы в генофоне линии ЮВ-28Б ме-
тодом беккроссов. Высота растений у короткостебельных линий была сни-
жена
dw
-генами на 35-52 % по сравнению со стандартной линией ЮВ-28Б [1].
В асептических условиях ламинар-бокса вычленяли неокрашенные пыль-
ники, содержащие микроспоры на поздней одноядерной стадии и помещали
на питательную среду. Использовали среду Мурасиге-Скуга с увеличенным
содержанием нитрата калия КNO
3
до 3,1 г/л, гидролизата казеина 400 мг/л
и добавлением регуляторов роста: β-индолил-3-уксусной кислоты (ИУК) 1
мг/л, 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты (2,4 Д) 2 мг/л, 6-бензиламинопу-
рина (БАП) 0,5 мг/л. Для определения оптимального состава питательной
среды для культивирования пыльников добавляли сахарозу в двух концен-
трациях 30 и 60 г/л.
Анализ пыльников проводили на 30 сутки культивирования. Затем пыль-
ники с вновь образованными на них структурами переносили на питательную
среду Мурасиге-Скуга с добавлением 6-бензиламинопурина (БАП) 0,5 мг/л,
сахарозы 30 г/л, гидролизата казеина 500 мг/л, инозита 100 мг/л и агара 8 г/л.
Качество новообразований (каллусов или эмбриоидов) изучали цитологиче-
скими методами.
Результаты
На 30 сутки культивирования на пыльниках наблюдали большое количе-
ство калусса двух типов: в основании (рис. 1а) на раневой поверхности (пред-
положительно соматический) и на боковой поверхности пыльника (рис. 1б),
предположительно андроклинного происхождения.
Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека