NED373392NED

222 Труды Федерального центра охраны здоровья животных. Том X – пипетки стеклянные мерные вместимостью 1,0 и 2,0 см 3 ; – среду Эдварда полужидкую с 0,3 % агара; – среду Эдварда полутвёрдую с 1,3 % агара. Содержимое трех ампул объединяют и отбирают 3,0 см 3 ви- руссодержащей суспензии клеток, которую подвергают трех- кратному замораживанию–оттаиванию при температурах минус 70  С и 37  С, центрифугируют при 1000 g в течение 10 мин (для осаждения разрушенных клеток), затем надосадочную жидкость высевают по 1,0 см 3 в 2 пробирки с полужидким агаром. Высевы помещают в термостат при температуре 37,0±0,5°С на 7 сут., по- сле чего проводят пересев на такое же количество пробирок. Все- го проводят три последовательных пассажа с интервалом в 7 сут. При помутнении полужидкого агара любого пассажа, про- водят пересев на полутвердый агар, температура и время инку- бирования пересевов – аналогичны. Рост микоплазм на всех средах должен отсутствовать. При получении сомнительных результатов проводят дополнительное электронно-микроскопическое исследование вакцины методом негативного контрастирования или другим, обеспечивающим объективный результат. Определение контаминации чужеродными вирусами. Для испытания применяют: – термостат с температурой нагрева 37,0±0,5°С (любой с указанными характеристиками); – овоскоп; – СПФ-эмбрионы кур 4-6-, 8-9- и 11-12-сут. возраста; – 1 %-ную суспензию эритроцитов петуха; – пипетки стеклянные мерные; – пробирки стеклянные; – шприц, вместимостью 1,0 см 3 ; – иглы инъекционные; – среду культуральную питательную (любую); – раствор натрия хлорида изотонический 0,9 %-ный для инъекций (физраствор). Контроль проводят методом биопробы на развивающихся СПФ-эмбрионах кур. Для исключения контаминации вирулентным вирусом бо- лезни Марека и возбудителем инфекционного энцефаломиелита Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека