NED373392NED

Вопросы биотехнологии 223 (ИЭМ) заражают 4–6-сут. СПФ-эмбрионы в желточный мешок и наблюдают 13–14 сут. Гибель зараженных эмбрионов счита- ется специфической с 5–6 сут. после заражения. Для исключения контаминации вирусами ньюкаслской бо- лезни (НБ), гриппа птиц и инфекционного бронхита (ИБ) зара- жают 8–9-сут. СПФ-эмбрионы в аллантоисную полость и наблюдают 6–7 сут. Гибель зараженных эмбрионов считается специфической с 4–5 сут. после заражения. С целью исключения контаминации вирусами оспы птиц и инфекционного ларинготрахеита (ИЛТ) заражают 11–12-сут. СПФ-эмбрионы на хориоаллантоисную оболочку (ХАО). Гибель зараженных эмбрионов считается специфической с 4–5 сут. Для заражения эмбрионов матриксную расплодку штаммов разводят культуральной питательной средой 1:2 и инъецируют данную суспензию по 0,2 см 3 в эмбрион. Заражают по 5 эмбри- онов каждого возраста и по 5 эмбрионов оставляют в качестве контроля. Эмбрионы инкубируют в термостате при температуре 37,0±0,5°С: зараженные в желточный мешок – 13 сут., в аллан- тоисную полость – 6–7 сут., на ХАО – 5 сут., ежедневно прово- дя овоскопию. В первые 24 ч инкубирования гибель эмбрионов считается неспецифической. Допускается гибель по 1 эмбриону при заражении в желточный мешок и на ХАО. По окончании инкубирования эмбрионы охлаждают при температуре 8 o С в течение 12 ч и вскрывают. От эмбрионов, заражённых в аллантоисную полость, отбирают пробы экстра- эмбриональной жидкости (ЭЭЖ) для исследования её в капель- ной РГА с 1 %-ной взвесью эритроцитов петуха. Суспензию эритроцитов петуха готовят согласно «Методи- ческим указаниям по выявлению парамиксовирусов, их иден- тификации и выявлению специфических антител», утвержден- ным ГУВ МСХ РФ № 004-3 06.02.91 г. [3]. Проводят три последовательных пассажа. Материалом для пассажей служат гомогенаты оболочки желточного мешка и ХАО, а также стерильная экстраэмбриональная жидкость павших или охлаждённых по окончании срока инкубирования эмбрионов. Патологические изменения эмбрионов должны отсутствовать. Электронная Науч ая СельскоХозяйственная Библиотека