NED373392NED

162 Труды Федерального центра охраны здоровья животных. Том X весенней виремии карпа (SVCV), возбудитель инфекционного некроза геморрагической ткани (IHNV), вирус инфекционного некроза поджелудочной железы(IPNV)). В качестве контроля использовали коммерческие наборы фирмы «Cypress» (Бельгия) для обнаружения в реакции непря- мой иммунофлюоресценции (НРИФ) вируса VHS. НРИФ стави- ли согласно инструкции фирмы-производителя. В работе использовали следующие вирусы: № 1 – референс-штамм вируса VHS Ка 66/00, полученный из Финляндии; № 2 – вирус инфекционного некроза геморрагической тка- ни (IHNV); № 3 – вирус весенней виремии карпа (SVCV); № 4 – вирус инфекционного некроза поджелудочной желе- зы (IPNV). № 5, 6, 7, 8, 9– изоляты вирусов, предоставленные сотруд- никами ГНУ ВНИИВВиМ г. Покров: № 5 – штамм вируса IHN 30/2; № 6 – штамм вируса VHS Щ1; № 7 – штамм вируса VHS Щ2; № 8 – штамм вируса VHS Щ3; № 9 – штамм вируса IPN Щ5. Вирусы культивировали на клеточной линии EPC. Титро- вание проводили на 96-луночных планшетах согласно стан- дартной методике на модифицированной среде Игла МЕМ с двойным набором аминокислот и витаминов с добавлением 10 % фетальной сыворотки КРС и антибиотиков в стандартной концентрации. При отсутствии СО 2 -инкубатора величину рН среды, равную 7,4, поддерживали с помощью Hepes в конечной концентрации 0,02 М. При наличии четко видимого цитопатогенного действия вируса, проявляющегося в появлении темных сферических кле- ток и их отделении от субстрата, приводящего к разрушению монослоя, последний фиксировали. Для этого удаляли культу- ральную среду и в каждую лунку добавляли 0,5 см 3 фиксатора (70 % раствор ацетона), затем инкубировали при 4 ºС и через 20 минут фиксирующий раствор удаляли. Лунки 2–3 раза промы- вали, затем высушивали. Электро ная Научная СельскоХозяйственная Библиотека