NED373392NED

Болезни сельскохозяйственных животных 163 На монослой инфицированной вирусами культуры клеток и неинокулированной контрольной культуры клеток наносили по 0,05 см 3 ФИТЦ-иммуноглобулина к вирусу VHS согласно схеме опыта, осторожно распределяя жидкость по поверхности лунки. Для определения активности ФИТЦ-иммуноглобулина к ви- русу VHS на монослой зараженный вирусом VHS культуры кле- ток EPC наносили следующие разведения ФИТЦ-иммуноглобу- лина от 1:20 до 1:140. Затем планшеты накрывали крышкой и инкубировали при температуре 18–20 ºС в течение 1 ч. Потом лунки промывали 5–6 раз, добавляли 50 % раствор глицерина из расчета 0,2 см 3 в каж- дую лунку и исследовали под люминесцентным микроскопом. Результаты оценивали по наличию специфического свече- ния. Цитоплазма пораженных вирусом VHS клеток светится неоднородно, ярко-зеленым или желтовато-зеленым цветом. При просмотре незараженной культуры клеток и культур, зара- женных гетерологичными вирусами, отмечается слабое диф- фузное неспецифическое свечение. За рабочее разведение ФИТЦ-иммуноглобулина принимали величину его наибольшего разведения, при котором в поле зре- ния специфически светится не менее трех клеток. Результаты исследования В ходе изучения активности полученного ФИТЦ- иммуноглобулина к вирусу VHS при постановке прямой РИФ было установлено наличие специфического свечения ярко- зеленого цвета пораженной референс-штаммом вируса VHS культуры клеток при использовании всех разведений данного ФИТЦ-иммуноглобулина от 1:20 до 1:140 (табл. 1). Таблица 1 Определение активности ФИТЦ-иммуноглобулина к референс-штамму вируса VHS № Разведение ФИТЦ- иммуноглобулина Наличие специфического ярко-зеленого свечения 1 1:20 + 2 1:40 + 3 1:80 + 4 1:100 + 5 1:120 + 6 1:140 + Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека