NED373390NED

Актуальные вопросы болезней птиц и других видов животных 181 Для определения влияния времени хранения первично- трипсинизированных клеток КФ на их рост культуру клеток КФ выращи- вали в роллерных сосудах из клеточных суспензий, находившихся при 4ºС в течение 1, 3 и 5 сут. Концентрация клеток при посеве составляла 600-800 тыс/см 3 . Внося 300 см 3 поддерживающей среды ПСП, монослой клеток инфицировали вирусом с М=0,3-0,5 ТЦД 50 /кл. Через 72 ч опреде- ляли инфекционную активность вируса. Результаты и обсуждение На первом этапе исследований было изучено влияние продолжитель- ности хранения первичной культуры клеток КФ на качество монослоя и репродукцию МПВ птиц штамм «PV03-B». Результаты исследований представлены в табл. 1. Во всех случаях хранения клеток в суспензии в течение 3 сут. со сме- ной среды наблюдался сплошной, плотный монослой, при заражении кото- рого титр вируса был 7,12±0,13 – 7,35±0,13 lg ТЦД 50 /см 3 . Хранение клеток в течение 3 сут. без смены среды приводило к снижению титра вируса на 0,5 lg ТЦД 50 /см 3 , и качество монослоя было удовлетворительным. После хранения клеток без смены среды и со сменой в течение 5 сут. потенция ро- ста клеток была понижена, в результате чего формировался неравномерный монослой, который был рыхлым и легко отслаивался при встряхивании. Но, несмотря на удовлетворительное состояние монослоя, вирус репродуциро- вался, и титр его составил 5,48±0,50 и 6,12±0,13 lg ТЦД 50 /см 3 . Следователь- но, первично трипсинизированную культуру клеток КФ после 3 сут. хране- ния при температуре 4ºС со сменой среды можно использовать в опытах. Таблица 1 Влияние продолжительности хранения суспензии клеток КФ на качество монослоя и репродукцию МПВ птиц штамм «PV03-B» (n=3) Срок хранения, сут. Метод хранения Живые клетки, % Качество монослоя Титр вируса, lg ТЦД 50 /см 3 1 без смены среды 97 сплошной, плотный 7,38±0,12 со сменой среды 99 сплошной, плотный 7,35±0,13 3 без смены среды 75 сплошной, неплотный 6,61±0,13 со сменой среды 95 сплошной, плотный 7,12±0,13 5 без смены среды 70 70-80 % 5,48±0,50 со сменой среды 90 сплошной, неплотный 6,12±0,13 Электронная Научная С льскоХозяйственная Библиотека