NED373390NED

182 Актуальные вопросы болезней птиц и других видов животных При отработке способов культивирования МПВ птиц в первичной культуре клеток КФ отмечено: в 1-й группе опыта через 48 ч культиви- рования вируса наблюдалось закисление pH среды из-за уменьшенного объема поддерживающей среды, в нее добавляли 7,5% бикарбонат натрия до значения pH среды 7,4-7,5 для поддержания инфекционной активности вируса; во 2, 3 и 4-й группах в течение 24 ч культивирования вируса при просмотре под микроскопом отмечали максимальное прикрепление вне- сенных клеток; в 4-й группе через 24 ч после дополнительного внесения на монослой «свежих» или хранившихся клеток почти все добавленные клетки прикреплялись, а через 48 ч отмечали образование полислоя. Данные культивирования МПВ птиц в монослое культуры клеток КФ в матрасах и вращающихся бутылях при обычном методе, уменьшенном объеме поддерживающей среды, внесении дополнительных клеток куль- туры КФ представлены в табл. 2. Данные, представленные в табл. 2, свидетельствуют о том, что при роллерном культивировании МПВ уровень накопления вируса выше, чем при стационарном. При роллерных методах культивирования наибольшая активность вируса отмечена в полислойной культуре клеток КФ. Таблица 2 Накопление МПВ птиц штамм «PV03-B» в культуре клеток КФ при различных способах культивирования (n=3) Репродукция вируса в культуре клеток КФ, lg ТЦД 50 /см 3 В матрасах В роллерных сосудах Обычный метод Уменьшенный объем среды (1 группа) Роллерно- суспензионный (2 группа) Внесение клеток со средой (3 группа) Полислой (4 группа) 7,08±0,14 7,33±0,14 7,83±0,14 7,90±0,08 8,05±0,14 8,54±0,13 Использование однослойной стационарной первичной культуры клеток КФ позволило получить вирус с титром 7,08±0,14 lg ТЦД 50 /см 3 , пригодный для производства вакцины. При этом столкнулись с рядом трудностей, связанных с излишними затратами рабочего времени и ма- териалов. Более выгодной оказалась роллерная культура, которая имела оптимальное отношение полученной площади культивирования к объему питательной среды, создавая благоприятные условия для накопления кле- ток и размножения вируса. Титр вируса составлял 7,33±0,14 lg ТЦД 50 /см 3 . Уменьшение объема поддерживающей среды в 3 раза повышало титр ви- руса на 0,5 lg. При роллерно-суспензионном культивировании вируса титр Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека