NED373390NED

174 Актуальные вопросы болезней птиц и других видов животных слиянием клеток, появлением симпластов и окон во всем монослое. Титр вируса находился в пределах 6,83±0,29 lg ТЦД 50 /см 3 . Размножение МПВ птиц в 3-суточной первичной культуре клеток КФ с плотным монослоем сопровождалось развитием ЦПД, которое начина- лось через 24 ч и достигало максимума через 72 ч после заражения. Оно проявлялось округлением клеток и изменением характерного морфологи- ческого рисунка культуры через 24 ч роста вируса, слиянием отдельных клеток и образованием симпластов, формированием крупных симпластов с вакуолизацией цитоплазмы через 48 ч и появлением окон в монослое через 72 ч после инфицирования. Поражение монослоя было на 85-90%, титр вируса достигал 7,42±0,14 lg ТЦД 50 /см 3 . В 4-суточной культуре клеток КФ монослой был плотным, в цито- плазме клеток отмечали зернистость. Размножение вируса, по сравнению с 3-суточной культурой, с деструктивными изменениями в клетках про- исходило слабее. ЦПД вируса развивалось медленнее и было менее вы- раженным. Поражение монослоя составляло 80-85%, титр вируса был в пределах 7,0±0,25 lg ТЦД 50 /см 3 . Установлено, что в 1- и 2-суточных культурах клеток КФ из-за мень- шего количества клеток в монослое и в 4-суточной культуре, где клетки были менее чувствительными к вирусу, МПВ птиц штамм «PV03-B» на 72 ч имел инфекционные титры ниже, чем в 3-суточной культуре КФ: от 5,25±0,25 до 7,0±0,25 lg ТЦД 50 /см 3 . 3-суточная культура клеток КФ являлась наиболее пригодной для выращивания МПВ птиц, накопление вируса в ней было максимальным, титр вируса составлял 7,42±0,14 lg ТЦД 50 /см 3 . Таким образом, физиологическое состояние клеточной популяции и количество клеток являются важным фактором, определяющим интенсив- ность размножения МПВ птиц, степень проявления ЦПД и титр вируса. Вторым этапом исследований было определение накопления МПВ птиц штамм «PV03-B» в первичной культуре клеток КФ в зависимости от множественности заражения. 3-суточную культуру клеток КФ заражали вирусом множественно- стью инфицирования 0,01; 0,1; 1,0 ТЦД 50 /кл и инкубировали при темпера- туре 37,5±0,5ºС в течение 72 ч. Полученный вируссодержащий материал замораживали на 24 ч при температуре минус 40ºС и оттаивали при комнатной температуре 18-22ºС. Путем встряхивания отделяли льдинками инфицированные клетки с вну- тренней поверхности стекла роллерного сосуда. После оттаивания вирус- содержащую суспензию титровали в первичной культуре клеток КФ. На- Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека