NED373390NED

Актуальные вопросы болезней птиц и других видов животных 173 МПВ птиц титровали в односуточной монослойной первичной куль- туре клеток КФ методом последовательных 10-кратных разведений. Титр вируса рассчитывали по методу Кербера в модификации Ашмарина и вы- ражали в lg ТЦД 50 /см 3 . Стерильность вируса определяли по ГОСТ 28085-89. Контроль кле- ток, вируса и сыворотки на контаминацию микоплазмами проводили в среде Кагана. Результаты и обсуждение При изготовлении вакцины необходимо знать время максимального накопления МПВ птиц в первичной культуре клеток КФ, поскольку титр вируса является одним из основных показателей, характеризующих каче- ство полученного вируссодержащего материала. Первым этапом наших исследований было определение влияния воз- раста культуры клеток КФ на накопление МПВ птиц штамм «PV03-B». 1-, 2-, 3- и 4-суточные культуры клеток КФ заражали вирусом с мно- жественностью инфицирования, равной 0,1 ТЦД 50 /кл. Титр инфекцион- ной активности вируса определяли через 72 ч после заражения. Результа- ты исследований по определению влияния возраста культуры клеток КФ на титр МПВ птиц представлены в табл. 1. Таблица 1 Накопление МПВ птиц штамм «PV03-B» в первичной культуре клеток КФ в зависимости от возраста заражаемой культуры Возраст культуры, сут. Качество монослоя Титр вируса, lg ТЦД 50 /см 3 1 редкий 5,25±0,25 2 средней плотности 6,83±0,29 3 плотный 7,42±0,14 4 плотный 7,0±0,25 В редком монослое суточной культуры клеток КФ МПВ птиц размно- жался быстро, судя по цитопатическому действию (ЦПД), которое было выраженным, охватывало весь монослой с появлением округлых клеток, образованием крупных симпластов и окон. Инфекционный титр вируса составлял 5,25±0,25 lg ТЦД 50 /см 3 . В 2-суточной культуре КФ из-за большего количества выросших кле- ток, по сравнению с суточной культурой, монослой имел среднюю плот- ность. ЦПД МПВ птиц было четким и характеризовалось округлением, Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека