ЭлБиб

НЕКОТОРЫЕ 0 ( 4 ЦЕННОСТИ ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ И ВОЗМОЖНАЯ

РОЛЬ НА/1<Ь-ИЗОЦИТРАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ В ХЛОРОПЛАСТАХ

SPIRODELA POLYRHIZA (L.)

Т.И.Рахманова, Т.Н.Попова, В.Г.Артюхов, А.В.Семенихина

Воронежский государственный университет, г.Воронеж, Россия

факс: (0732)789755; E-mail:

ВВЕДЕНИЕ

НАДФ-изоцптратдегидрогеназа (КФ 1.1.1.42; НАДФ-ИДГ) катализирует

реакцию окислительного декарбоксилирования Tpeo-Ds-изоцитрата до 2-

оксоглутарата. НАДФ-ИДГ представлена несколькими изоформами, которые

имеют различную субклеточную локализацию. Предполагается, что реакция,

катализируемая НАДФ-ИДГ, является в хлоропластах одним из источников 2-

оксоглутарата, выполняющего функции предшественника глутамата и основного

акцептора азота в реакциях переаминирования /1, 2/. В этой связи исследование

некоторых регуляторных свойств хлоропластной НАДФ-ИДГ способствует

пониманию вопросов регуляции и координации углеродного и азотного

метаболизма на уровне ферментативных превращений 2-оксоглутарата в высших

растениях.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

В качестве объекта исследования использовались вегетативные талломы

ряски

Spirodela polyrhiza

(сем.

Lemnaceae),

культивируемые на минеральной

питательной среде в стерильных условиях при освещении и температуре 25°С

/3/.Активность фермента определяли на спектрофотометре СФ-26 при 340 нм в

среде следующего состава: 0,05 М Tris-HCl-буфер (pH 7,8), 1,5 мМ изоцитрат,

2 мМ МпСЬ и 0,5 мМ НАДФ. О скорости ИДГ-реакции судили по возрастанию

оптическом плотности в результате восстановления НАДФ в ходе

катализируемого ферментом превращения изоцитрата в 2-оксоглутарат. За

единицу активности (ФЕ) принимали количество фермента, катализирующее

образование 1 мкмоль продукта реакции за 1 мин при 25°С. Активность выражали

400

Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека