310 / 540
Обьектом исследования служили растения озимой пшеницы (Triticum
aestivum L.) морозостойкого сорта Мироновская 80S в фазе начала кущения.
Опытные растения на сутки помещали в кондиционированную камеру с
температурой 2 °С.Пробы апикальных меристем узлв кущения брали в течение
суток через каждые два ч после охлаждения. Контролем служила проба, взятая
перед охлаждением. Апексы длиной 2-3 мм препарировали с помощью
стереомикроскопа. Получение фракции клеточных стенок и выделение из нее
лектинов осуществляли по методу
[3]. Лектины тестировали посредством
микротитрования исследуемой фракции на иммунологических планшетах с
последующим добавлением в лунки 2,5%-ой суспензии эритроцитов кролика,
предварительно обработанных трипсином. Для анализа полипептидного состава
проводили электрофорез в денатурирующей системе по Laemly [4].
В первые б ч охлаждения содержание белка не изменялось, в последующие
4 ч резко возрастало и к концу опыта превышало исходный уровень в 2 раза. При
этом происходило изменение состава полипептидов клеточной стенки. Как видно
из таблицы у незакаленных растений были обнаружены 5 белков (с м.м. 63 кД, 61
кД, 58 кД и 54 кД и 52 кД ) и уже через 2 ч охлаждения появлялся белок с м.м. 109
кД, через 6 ч охлаждения выявлены еще три белка с м.м. 125 кД, 87 кД и 75 кД. К
концу опыта исчезали два белка (с м.м. 87 кД и 75 кД) и оставалось 9.
Таблица
Полйпептидный состав белков клеточной стенки при 2 °С
Длительность
охлаждения, ч
Молекулярная масса белков, кД
125 109 87 75 63 61 58 54 52 44 34
0
-
-
-
-
+ +
+ +
_
-
2
■ .
■+
,
_■
+ ■ + ■+ + +
■ -
-
6
+ + + + + + + + + + ‘ +
24
+ + -
-
-г
+ + + +
+
Примечание: знак (-ь) - наличие, знак (-) - отсутствие.
На фоне этих изменений, как видно из рисунка, активность лектинов
клеточной стенки почти не изменялась, а затем сильно возрастала на протяжении
последующих 20 ч, превышая к концу опыта исходный уровень в 5 раз.
292
Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека