NED360717NED

б) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10111213141516 Рис. 2. Сравнение RAPD-профилей геномной ДНК люцерны, полученных разными способами: 1 — молекулярный маркер; 2-16 — продукты ПЦР-анализа потомства в сегреги­ рующей популяции люцерны: а) стандартные условия — одиночный 10-мерный праймер, t° гибридизагщи 37°С; б) модифицированные условия — 2 праймера с до­ полнительным нуклеотидом, t° гибридизации 52 °С. В результате ПНР образцов геномной ДНК люцерны с праймера­ ми, имеющими дополнительный нуклеотид, получили ампликоны, ме­ нее чувствительные к вариациям температурных условий, времени, чис­ ла циклов реакции и т. д. (рис. 3). Рис. 3. Влияние параметров амплификации на выход ПЦР-продуктов и воспроизводимость реакции для трех выбранных генотипов люцерны 1 — молекулярный маркер; 2-4 — амплификация с двумя 11-мерными праймерами в 40 циклах реакции (при t°отжига 52 °С в течение 127 сек; объем смеси для ПЦР 25 мкл); 5-7 — амплификация с двумя 11-мерными праймерами в 30 циклах реакции (при t° отжига 52 °С в течение 40 сек; объем смеси для ПИР 12 мкл); 8-10 — ампли­ фикация с рандомным 10-мерным праймером в 40 циклах реакции (при t° отжига 37 °С в течение 127 сек; объем смеси для ПЦР 25 мкл). 184