ЭлБиб

Переваримость сухого вещества in vitro

Возможности использования показателя переваримости в селекции

многолетних трав существенно расширились после введения в лаборатор

ную практику метода in vitro, основанного на определении степени перева

ривания корма с помощью ферментов пепсина, целлокандина или других

ферментов аналогичного действия. Этот метод не требует больших затрат,

дает возможность быстро определить переваримость сухого вещества

в небольших пробах. Для анализа берут пробы, высушенные в сушильном

шкафу при температуре + 65 °С до воздушно-сухого состояния и измель

ченные на частицы размером 1 мм. Из проб берут навески по 0,5-0,6 г

в трех-четырех повторностях, помещают в стеклянные центрифужные

пробирки емкостью 60-100 мл и хранят до начала опыта при температуре

+ 38 °С.

В пробирки автоматической пипеткой добавляют по 50 мл 0,2%-ного

раствора пепсина в соляной кислоте (2 г сухого медицинского препарата

пепсина на 1 л 0,1%-ной НС1). Закрывают пробками и выдерживают в тер

мостате 24 часа при температуре + 38-40 °С. Периодически (не менее трех

раз в сутки) содержимое пробирки перемешивают вручную так, чтобы час

тицы корма не оставались на стенках пробирок. Затем центрифугируют

в течение 5 мин при 2500 об/мин, подосадочную жидкость удаляют водо

струйным насосом и фильтровальной трубкой.

К остатку в пробирках приливают 50 мл раствора целлюлозы — 5 г

целлокандина в 1 л цитрат-фосфатного буфера с pH 4,6 и помещают в тер

мостат на 48 часов при + 38^10 °С. Периодически содержимое пробирок

перемешивают вручную. Надосадочную жидкость удаляют водоструйным

насосом, остаток промывают 50 мл дистиллированной воды, центрифуги

руют и снова отсасывают надосадочную жидкость. Пробирки с остатком

помещают в сушильный шкаф, высушивают при + 105 °С до постоянной

массы и после охлаждения в эксикаторе взвешивают с погрешностью до

0,001 г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое ре

зультатов двух параллельных определений. Допустимое расхождение не

должно превышать 3 %.

Кроме того в лабораторные определения желательно включать кон

трольный образец корма с известной переваримостью сухого вещества,

определенной непосредственно на животных. Это позволяет вносить ко

эффициент поправки и сравнивать данные, полученные в разное время.

Зимостойкость

Достоверную оценку зимостойкости можно получить при использо

вании прямых полевых методов, из которых наиболее объективным явля

Научная электро н я библиотека ЦНСХБ