209 / 294
Из таблицы видно, что большее число штаммов (более 70 %) спо
собно сохранять жизнеспособность в сильнокислой среде (pH 4,5). Кон
центрация ионов
А 1 3+
в 100 мг/л оказалась губительна для всех изучае
мых штаммов клубеньковых бактерий. Результаты эксперимента пока
зали, что отбор кислотоустойчивых штаммов
Rh. trifolii
целесообразно
проводить на бобовой питательной среде с добавлением 75 мг/л
А 1 .
Отбор штаммов на эффективность симбиоза с клевером луговым
проводится в микровегетационном опыте по методике
В Н И И С Х
мик
робиологии в модификации
В Н И И
кормов. Растения выращиваются
в пробирках емкостью 50 мл, наполненных вермикулитом.
В
питатель
ную безазотистую среду Красильникова-Кореняко вносятся ионы
А 1 3+
в форме
А 1 С 1 з
в концентрации 50 мг/л раствора, pH которого должно
составлять 4,5.
Далее селекционная работа на увеличение азотфиксирующей спо
собности клевера идет в двух направлениях: подбор комплементарных
штаммов к уже имеющимся сортам и перспективным номерам клевера
лугового и создание нового селекционного материала на основе ото
бранных симбиотических систем «генотип + штамм».
Оценка и отбор генотипов клевера лугового с повышенной азот
фиксирующей способностью проводится на ранних стадиях онтогенеза
в условиях стерильного микровегетационного опыта на безазотистой
питательной среде при инокуляции эффективными местными штамма
ми клубеньковых бактерий. Для того чтобы не сужать популяцию сорта
по генам, контролирующим хозяйственно-биологические признаки,
в популяции следует оценивать не менее 100 растений. Это обеспечит
достаточную объективность оценки и эффективность отборов.
Основными критериями, учитываемыми при отборе генотипов
с высокой симбиотичностью, являются количество, размер и окраска
клубеньков, биомасса растений и интенсивность листообразования, ко
торая в таких условиях тесно коррелирует с их азотфиксирующей ак
тивностью. Эффективными и комплементарными по отношению к оп
ределенному сорту считаются штаммы, дающие увеличение биомассы
на 60-70 % по сравнению с неинокулированными растениями.
Генотипы, отличающиеся максимальным накоплением биомассы,
наибольшей интенсивностью образования клубеньков и листьев, отби
раются для получения семенного потомства и проведения последующих
отборов. Как правило, частота встречаемости генотипов с повышенной
эффективностью симбиоза в популяции не превышает 1-3 %. Для уси
ления симбиотических свойств микросимбионта из клубеньков лучших
генотипов клевера лугового проводится повторное выделение штаммов
(метод пассирования).
206
Научная электронная библиотека ЦНСХБ