

кислотах и от их активности будет зависеть устойчивость мембран
к действию низкой температуры.
Согласно общим представлениям об устойчивости растений к
гипотермии при снижении температуры происходит умеьшение
текучести мембран, что может служить сигналом, передающимся
или воспринимающимся регуляторными последовательностями
генов десатураз. Вследствие этого индуцируется экспрессия этих
генов, что приводит к усиленному синтезу ферментов в клетке и к
ускорению синтеза полиненасыщенных ЖК в мембранных
липидах. В конечном итоге восстанавливается исходная текучесть
мембран и физиологическая активность связанных с ними систем,
в частности, фотосистем и АТФ-синтезирующих комплексов [1].
Известно, что первая двойная связь в положении А9 , оказывает
сильное влияние на жидкостные свойства цепей жирных кислот и
может появляться в жирных кислотах в липид-связанной форме. В
связи с этим нами были использованы растения табака
трансформированные геном А9 - ацшьлипидной десатуразы из
синезеленой водоросли Synechococcus vulkanus, клонированного
под контролем 35S CaMV промотора вируса мозаики цветной
капусты. Экспрессия данного гена была подтверждена
молекулярными методами.
В качестве контроля использовали растения, трансформированные
пустым бинарным вектором pGA482. Растения выращивали in
vitro на среде Мурасиге-Скуга при t=22°C [2].
Известно, что содержание ненасыщенных жирных кислот в
клеточных мембранах изменяется при перекисном окислении
липидов, одним из конечных продуктов которого является
малоновый диальдегид. Его образование происходит за счет
активации
свободнорадикальных
реакций
с
участием
активированных форм кислорода, приводящих к перекисному
окислению ненасыщенных жирных кислот липидов мембран и
уменьшению количества последних [3]. Поэтому для выявления
изменений степени устойчивости растений к гипотермии под
влиянием трансформации гена А9 - ацил-липидной десатуразы,
был использован метод определения ПОЛ.
Содержание малонового диальдегида (МДА) определяли по
цветной реакции с тиобарбитуровой кислотой с последующим
измерением оптической плотности на спектрофотометре СФ-46
(«ЛОМО», Россия). Расчет концентрации МДА проводили по
266
Научная электронная библиотека ЦНСХБ